康为世纪 柱式基因组DNA提取试剂盒
产品名称:康为世纪 柱式基因组DNA提取试剂盒产品货号:CW2298M英文名称:Universal Genomic DNA Kit 产品规格:200 preps
产品介绍:
本试剂盒适合于从新鲜或冷冻的动物组织、细胞、血液、细菌等多种样品中提取高纯度总DNA。本品可纯化获得分子量最大为50 kb的核酸片段,纯化过程不需使用苯酚或氯仿等有毒溶剂,无需乙醇沉淀。本试剂盒采用优化的缓冲体系使裂解液中的DNA高效特异的结合到硅基质离心吸附柱上,PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤被有效去除,最后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可得到高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
产品名称:康为世纪 柱式基因组DNA提取试剂盒
产品货号:CW2298M
产品组份:
自备试剂:
无水乙醇
Enzymatic Lysis Buffer(提取革兰氏阳性菌基因组DNA时须准备)。
Enzymatic Lysis Buffe配方:20 mM Tris,pH8.0;2 mM Na2-EDTA;1.2% Triton
X-100;终浓度为20 mg/ml的Lysozyme(溶菌酶)。
产品特点:
●简单方便:提取速度快,仅需40分钟即可完成基因组DNA提取。
●高纯度:纯化得到的DNA ODSen.s.比值在1.7-1.9之间,完整度高(>15 kb),可用于二代测序、定量PCR、芯片检测等下游实验。
●高通量:可与液体工作站、磁珠法自动纯化系统匹配使用。
实验前准备及重要注意事项:
1.向Proteinase K中加入用量的Proteinase K Storage Buffer使其溶解,-20℃保存。配制好的Proteinase K勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的核酸片段较小且提取量下降。
3.如果提取次生代谢产物大量积累或细胞壁厚的细菌培养物的基因组,建议在对数生长期早期收集样品。
4.第一次使用前应按试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5.使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GL和Buffer GTL于56℃水浴重新溶解。
6.如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入Buffer GL前加入4 μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml)
操作步骤:
血液及细胞样本基因组提取
1.材料处理
1a. 如果提取材料为哺乳动物抗凝血液(无核红细胞),可直接向50-200 μl新鲜或冷冻的抗凝血液样品中加入Buffer GTL补足至200 μl;
1b. 如果提取材料为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液,其红细胞为有核细胞,取5-10 μl新鲜或冷冻的抗凝血液样品,加入Buffer GTL补足至200 μl;
1c.贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液(最大提取量为5×106个细胞),2,000rpm(400×g)离心5分钟,弃尽上清,加200 μl GTL,振荡至样品*悬浮;
2.加入20 μl Proteinase K。
3.加入200 μl Buffer GL,涡旋震荡充分混匀,56℃水浴10分钟。
4.短暂离心以去除管盖内壁的水珠。加入200 μl无水乙醇,涡旋震荡充分混匀。短暂离心。
5.上一个步骤中所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱(Spin Columns DM)中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12,000 rpm(~13,400 ×g) 离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12,000 rp离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8.12,000 rpm离心2分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟,以*晾干。
9.将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-200 μlBuffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12,000 rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
保存条件:室温(15-30℃)
产品订购信息:
品牌 货号 名称 规格
康为世纪 CW2298M Universal Genomic DNA Kit 200preps
产品名称:康为世纪 柱式基因组DNA提取试剂盒
产品货号:CW2298M
关于公司:
康为世纪是主要从事高附加值、高技术含量的生物试剂的研发与生产,为生命科学研究、基因检测和体外诊断用户提供创新型生物产品和服务。康为世纪建立了专业化、集约化、能够形成自主知识产权的技术创新体系和开放式的合作创新平台,构建成了公司完整的研发创新体系。产品线主要包括分子诊断原料酶、核酸采集与保护剂、核酸提取试剂盒、分子诊断检测试剂等,打破了中国生物研究与产业对进口试剂的依赖。
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