康为世纪 无内毒素质粒小提试剂盒 1-5 ml
产品名称:康为世纪 无内毒素质粒小提试剂盒 1-5 ml产品货号:CW2106S英文名称:EndoFree Plasmid Mini Kit 产品规格:50 preps
产品介绍:
本试剂盒适合提取1-5 ml菌液,在碱裂解法裂解细胞的基础上,通过新型硅基质膜高效专一的结合质粒DNA,每个吸附柱最高可吸附40 μg的质粒DNA,同时采用特殊的缓冲液系统和除内毒素过滤柱,有效去除内毒素、蛋白等杂质。由本试剂盒所得质粒纯度高、质量稳定,特别适用于细胞转染,同时也可用于DNA测序,PCR,基于PCR的突变,体外转录,转化细菌,内切酶消化等下游实验。
产品名称:康为世纪 无内毒素质粒小提试剂盒 1-5 ml
产品货号:CW2106S
产品组分:
额外试剂需求:无水乙醇、异丙醇。
使用说明:
1.取1-5 ml过夜培养的菌液,加入离心管(自备)中,13,000 rpm(~16,200×g)离心30秒收集细菌,尽量吸弃全部上清。
2.向留有菌体沉淀的离心管中加入250 μl Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A),使用移液器或涡旋振荡器充分混匀,悬浮细菌沉淀。
3.向离心管中加入250 μl Buffer P2,温和地上下颠倒混匀8-10次,使菌体充分裂解,室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。
4.向离心管中加入250 μl Buffer E3,立即上下颠倒混匀8-10次,此时出现白色絮状沉淀,室温放置5分钟。13,000 rpm离心5分钟,吸取上清,将上清加入过滤柱(Endo-Remover FM)中,13,000 rpm离心1分钟过滤,滤液收集在离心管(自备)中。
5.向滤液中加入225 μl异丙醇,上下颠倒混匀。
6.柱平衡:向已装入收集管的吸附柱(Spin Columns DM)中加入200 μl Buffer PS,13,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7.将步骤5中滤液与异丙醇的混合溶液转移到平衡好的吸附柱(已装入收集管)中。
8.13,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9.向吸附柱中加入750 μl Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇),13,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。
10.将吸附柱重新放回收集管中,13,000 rpm离心
相关知识:
质粒(plasmid) 广泛存在于生物界,从细菌、放线菌、丝状真菌、大型真菌、酵母到植物,甚至人类机体中都含有。质粒是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体(或拟核)以外的DNA分子,存在于细胞质中(但酵母除外,酵母的2 μm质粒存在于细胞核中),具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息,是闭合环状的双链DNA分子。质粒具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。细菌质粒是DNA重组技术中常用的载体。载体是指把一个有用的外源基因通过基因工程手段,送进受体细胞中去进行增殖和表达的工具。将某种目标基因片段重组到质粒中,构成重组基因或重组体。
储存与运输
室温 (15-30℃)
产品订购信息
品牌 货号 名称 规格
康为世纪 CW2105S 无内毒素质粒中提试剂盒 50 preps
产品名称:康为世纪 无内毒素质粒小提试剂盒 1-5 ml
产品货号:CW2106S
关于公司:
康为世纪生物科技股份有限公司是一家立足于生命科学领域,有自主知识产权的国家优良企业,主要从事高附加值、高技术含量的生物试剂的研发与生产,为生命科学研究、基因检测和体外诊断用户提供创新型生物产品和服务。产品线主要包括分子诊断原料酶、核酸采集与保护剂、核酸提取、分子诊断检测试剂等,打破了中国生物研究与产业对进口试剂的依赖。
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