BD品牌 磁珠细胞分离系统试剂 小鼠CD4抗体
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产品名称：BD Pharmingen IMag 磁珠细胞分离系统试剂Anti-Mouse CD4 Magnetic Particles - DM (RUO)
产品货号：551539
产品规格：
品牌
BD IMag™
Clone
GK1.5""
Alternative Name
Cd4; CD4 antigen; L3T4; Ly-4; T-cell surface antigen T4/Leu-3
Isotype
Rat LEW, also known as Lewis IgG2b, κ
反应性
鼠 (QC Testing)
应用领域
Cell separation (Routinely Tested)
免疫原
Mouse CTL clone V4
Entrez Gene ID
12504
Storage Buffer
Aqueous buffered solution containing BSA and ≤0.09% sodium azide.
监管资质级别
RUO
产品介绍：
BD IMag™抗小鼠CD4颗粒是一种磁性纳米颗粒，其表面结合有单克隆抗体。使用BD-IMag对这些颗粒进行了优化，以选择或清除CD4携带的白细胞™ 电池分离磁铁。据报道，CD4（L3T4）分化抗原在大多数胸腺细胞、成熟T淋巴细胞亚群（即MHCⅡ类限制性T细胞，包括大多数T辅助细胞）和NK-T细胞亚群中表达。此外，CD4在多能干细胞、骨髓和B淋巴细胞前体、胸腺内淋巴细胞前体和脾脏树突状细胞亚群中也被检测到。准备和储存
在4℃下未稀释保存。通过亲和层析从组织培养上清或腹水中纯化单克隆抗体。在*条件下，将抗体或链霉亲和素与磁性粒子结合，去除未结合的抗体/链霉亲和素。
产品通知单
BD图像™ 粒子由羧基功能化磁性粒子制备，该磁性粒子由Skold技术制造，并获得美国转利号7169618的许可。
注意：叠N化钠在酸性条件下产生高毒性的叠氮酸。丢弃前，在自来水中稀释叠氮化合物，以避免管道中积聚潜在爆炸性沉积物。
所有血清蛋白来源于美国农业部检测的位于美国的屠宰场。
白细胞被BD-IMag标记™ 抗小鼠CD4颗粒-糖尿病根据磁标记协议。这个标记的细胞悬液随后被放置在BD-IMag的磁场中™ 电池分离磁铁（类别。第552311号）。有标记的细胞移向磁铁（正部分），使未标记的细胞处于悬浮状态，这样它们就可以被吸出（负部分）。然后将管子从磁场中取出，使正的部分再悬浮。将分离重复两次以提高正馏份的纯度。磁选流程图中给出了磁选步骤。在阳性组分被洗涤后，小尺寸的磁性颗粒允许阳性组分在下游应用（如流式细胞术）中进一步评估。
磁标记协议
一。根据标准实验室程序，从感兴趣的淋巴组织制备单细胞悬液。将悬浮液通过一个70μm的尼龙滤器，去除细胞团和/或碎片。
2。稀释BD-IMag™ 缓冲器（10X）（类别。编号552362）1:10，用无菌蒸馏水或制备1X BD IMag™ 用0.5%牛血清白蛋白、2毫米乙二胺四乙酸和0.09%叠N化钠补充磷酸盐缓冲液。放在冰上。
尽管我们的经验表明使用鼠标BD Fc块™ 纯化抗小鼠CD16/CD32单抗2.4G2（猫。第553141/553142号）不是*细胞分离所必需的，一些实验室可能希望在他们的研究中使用它。
如果添加鼠标BD Fc块™，继续执行步骤3。如果不添加鼠标BD Fc块™，继续执行步骤4。
三。添加鼠标BD Fc块™ 在0.25μg/10e6细胞上，在冰上培养15分钟。
四。用至少等体积的1X BD IMag清洗电池™ 缓冲液，仔细吸取所有上清液。
5个。旋转BD IMag™ *抗小鼠CD4磁性颗粒-DM，每10e7个细胞添加50微升颗粒。
6。充分混合。在6℃-12℃下冷藏30分钟。
7号。带上BD IMag™-颗粒标记体积高达1-8 x 10e7个细胞/毫升，带有1个BD-IMag™ 缓冲，然后立即将试管放在电池分离磁铁上。室温下孵育6-8分钟。
8个。将试管放在细胞分离磁铁上，小心地吸出上清液。这个上清液含有负的部分。
9号。从电池分离磁铁上取下管子，并添加1X BD IMag™ 缓冲到与步骤7相同的卷。轻轻地用移液管吸几次细胞，然后将试管放回细胞分离磁铁上再吸2-4分钟。
10个。将试管放在细胞分离磁铁上，小心地吸出上清液并丢弃。
11号。重复步骤9和10。
12岁。在后的清洗步骤之后，将阳性部分重新放入适当的缓冲液中，并以适当的浓度进行进一步分析。
注意：避免非特异性标记，快速工作并遵守建议的孵育时间。
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