Corning NK免疫细胞活化扩增培养套装
Corning NK细胞活化扩增培养套装：扩增能力强，在14天内可达到100倍扩增效应细胞比例高，可达80％操作方便
Corning® NK细胞活化扩增培养套装
NK细胞是当今免疫-治疗常用的细胞。但是NK细胞培养操作难度大，对培养条件、培养技术要求很高，难以获得高纯度高效能的活性细胞。 Corning NK细胞活化扩增培养基套装由多个组分组成，为 NK细胞培养提供简便的操作方案。使用该套装所获得细胞数量产量高，活性高，具有很高的杀伤效应。
Corning® NK细胞活化/扩增培养套装
英文名：Corning® NK Expansion Kit
中文名：Corning® NK细胞活化扩增培养套装
应用：NK细胞活化扩增
品牌产地：美国Corning
保存：2°C - 8°C
货号：88-570-kit
产品组成
NK细胞活化培养基
NK细胞活化添加剂
NK细胞扩增培养基
抗体预包被T75细胞培养瓶
细胞培养袋
产品特色
扩增能力强，在14天内可达到100倍扩增
效应细胞比例高，可达80％
操作方便
产品订购信息
品牌 | 货号 | 产品描述 | 包装 |
Corning | 88-570-kit | NK Kit for activation and expansion of human natural killer cells NK细胞活化/扩增培养基套装 | 1Kit |
套装包含 | 活化用 | Pre-coated T-75 flask 抗体预包被T75细胞培养瓶 | 1瓶 |
NK primary medium NK细胞活化培养基 | 1×50 mL | ||
NK primary supplement NK细胞活化添加剂 | 1×1.8 mL | ||
扩增用 | Expansion medium NK细胞扩增培养基 | 1×1000 mL | |
配件 | 细胞培养袋 | 1 x 640 cm2 |
华雅再生医学旗舰公司：红荣微再（上海）生物工程技术有限公司授权代理Corning免疫细胞治疗产品。红荣微再以“传递科学价值，服务科学研究"为宗旨，主营干细胞、精准医疗、细胞治疗、器官再生四大板块的产品。
： ：150、210、10459。红荣微再-客服: 经销商专员
Corning® NK细胞活化扩增培养套装
Corning® NK细胞活化扩增培养套装性能
图1. NK细胞在Corning培养基中能够得到更有效的扩增
图2. Corning培养基中获得的NK细胞具有更高的细胞毒性
健康人的PBMC细胞接种数量为3x107 ，根据厂家建议进行细胞培养。使用Corning培养基时，0-5天使用NK活化培养基 (Primary Medium)，6-14天使用NK 扩增培养基 (NK Expansion Medium )添加1000 IU/mL IL-2 进行培养。细胞培养至14天收获，进行细胞计数和肿瘤杀伤能力检测。肿瘤杀伤实验
使用的靶细胞为K562细胞。
图３. Corning培养基中获得的NK细胞具有更高的CD3-CD56+阳性率 (83.0% vs 67.6%)。
健康人的PBMC细胞根据厂家建议进行细胞培养。细胞培养至14天收获，进行细胞计数和检测。细胞使用CD3 FITC /CD56 PE进行染色，之后使用BD AccuriTM C6 flow cytometer进行检测。
Corning® NK细胞活化扩增培养套装使用方法
NK 细胞扩增和活化
1. 抗凝血室温离心，400 xg，10min，上层血浆转移到新管。
2. 热灭活自体血浆，56°C，30min。离心， 800 xg ， 20 min，去除沉淀。4°C 保存上清血浆，培养备用。
3. 加入等体积PBS（不含钙镁）替代被移除血浆保持体积不变，小心重悬血细胞。
注意：PBS预加0.1%人血清白蛋白（HSA）利于保持血细胞活性。
4. 使用淋巴细胞分离液从上面的血样中制备PBMCs（人外周血单个核细胞）。
注意：使用新鲜采集的人血（2h内采集）有利培养，不要使用超过24h的血样。
5. 至少5倍体积的PBS（不含钙镁）清洗PBMCs。室温离心500xg，10min，收集PBMCs。
6. PBMCs稀释到 1 x 106 cells/mL，使用NK活化培养基配比1.8mL NK活化添加剂和10%自体血浆。
7. 预包被T-75培养瓶使用前，用PBS（不含钙镁）清洗两次。
8. 添加30 mL PBMC悬液到预包被T-75培养瓶，37°C，5% CO2培养。
注意：第六天之前，如果培养基变黄，细胞密度超过2.0 x 106 cells/mL，需要添加新鲜的NK活化培养基配比10%自体血浆，保持细胞密度大于 5 x 105 cells/mL。
9. 培养第六天，培养液离心，适量NK扩增培养基（1000 IU/mL IL-2 和10%自体血浆）重悬细胞，再转移到T-225培养瓶或透气细胞培养袋。
10. 每隔两三天，根据细胞扩增状态，培养体系中添加新鲜的NK扩增培养基（1000 IU/mL IL-2 和10%自体血浆）保持细胞密度在5 x 105到 2.0 x 106 cells/mL之间。
注意：NK扩增阶段，所加新鲜培养基自体血浆含量推荐范围：0.5%-1%。
11. 培养14天左右，收获NK细胞。
注意：整个实验过程中，细胞悬液吹打和培养容器拍打都要轻柔，以避免细胞损伤，保持细胞活性。
咨询Corning® NK细胞活化扩增培养套装欢迎，： ：150、210、10459。红荣微再-客服: 经销商专员
