神经分化培养基NDiff 227

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Neural Differentiation Medium神经分化培养基NDiff 227（Y40002）是一款成分确定、无血清、包含N2 & B27添加剂的*培养基，用于将单层贴壁生长的小鼠胚胎干细胞向神经方向分化1。该款培养基上市时间超过10年，一共有超过47篇文献使用。

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Neural Differentiation Medium神经分化培养基NDiff 227

Neural Differentiation Medium神经分化培养基NDiff 227（Y40002）是一款成分确定、无血清、包含N2 & B27添加剂的*培养基，用于将单层贴壁生长的小鼠胚胎干细胞向神经方向分化¹。该款培养基上市时间超过10年，一共有超过47篇文献使用。

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产品特征-Neural Differentiation Medium NDiff 227

成分确定、无血清的*培养基。

经典配方，添加N2,B27。

只作用于小鼠细胞，有效促进小鼠胚胎干细胞向神经方向分化。

添加其他因子后，可以维持人/小鼠干细胞培养。

图一：分化培养中细胞形态变化

小鼠胚胎干细胞，在使用NDiff 227培养基单层贴壁培养后，分化为神经细胞。

图二：分化培养产物表达神经细胞标志物Nestin和TUJ1

应用-Neural Differentiation Medium NDiff 227

单层贴壁培养下小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化。

单层贴壁条件下的胚胎干细胞维持培养。

文库筛选化合物。

神经分化的生物特性和功能性的研究与评价。

当添加如Ying QL et al. (2003)文章中的添加剂，Neural Differentiation Medium NDiff 227可以支持小鼠胚胎干细胞无血清、无饲养层培养²。

Neural Differentiation Medium NDiff 227添加生长因子，可以用于成功培养人胚胎干细胞系^{3, 4}。

当添加FGF后，无血清的Neural Differentiation Medium NDiff 227培养基可以将小鼠胚胎干细胞分化为早期的定型内胚层细胞（Anterior Definitive Endoderm，ADE）前体，该前体可以高效分化为肝脏细胞和胰腺细胞⁵。

保存-Neural Differentiation Medium NDiff 227

-20℃保存，保质期一年。融化后，4℃避光保存，4周内使用。

使用方法-Neural Differentiation Medium NDiff 227

使用前准备：培养基避光水浴解冻，*解冻前转移培养基防止被加热，再接着柔力混合解冻全部培养基。也可以避光4℃解冻。如果出现沉淀，4℃过夜放置使沉淀*溶解。培养基有可见沉淀时不能使用，要确保使用前已经*溶解。

单层贴壁培养下的小鼠胚胎干细胞神经分化：

1.在明胶包被的塑料培养器皿中，添加NDiff 227培养基，接种早期传代的胚胎干细胞，接种密度：2.5 - 10 x 10³ cells/cm²。

2.每一两天更换培养基。神经分化早期预计会出现胚胎干细胞死亡造成的污染。

3.通过细胞形态和神经元标记物染色监控神经元分化。培养4-6天后，神经分化表现明显，7-9天后神经元成熟。

欢迎您致电咨询Neural Differentiation Medium NDiff 227 华雅再生医学旗舰公司：红荣微再（上海）生物工程技术有限公司  ：152 1681 4001。华雅再生医学-客服: 316 808 6348

背景知识

从胚胎干细胞或神经干细胞直接分化成神经细胞需要进行培养基优化保证结果的可靠性。

Neural Differentiation Medium NDiff 227，神经细胞分化的有效诱导培养基，通过使用传统配方再添加N2和B-27，可以进行简单高效的神经分化。

1. 为什么研究“体外干细胞向神经细胞分化"？

· 有一类病叫做神经退行型疾病，常见的包括阿尔茨海默病、帕金森病。神经退行性疾病的一个很显著的现象就是脑细胞的消亡减少和脑细胞正常功能的丧失。

· 干细胞治疗的概念在治疗神经退行性疾病的研究中有着很大的吸引力。生物医学研究者的大概设想是，在体外（如细胞培养皿、细胞培养瓶）把干细胞定向诱导分化成为神经细胞，获得这些从干细胞分化来的神经细胞后，把他们重新注射回到病人的脑部。这些注射回去的干细胞替代那些病人原来的不正常的干细胞，从而使得病人的症状得到缓解。

· 体外能够把干细胞诱导分化出神经细胞是干细胞治疗zui为基础的步骤。在2003年前的这方面的研究中，有两个条件被认为二者必据其一（只考虑贴壁培养干细胞的方式）：*，认为干细胞生长后形成好多细胞聚集在一起的（多层细胞）集落，是干细胞向神经细胞方向分化的必要条件；第二，认为与其他饲养层细胞共同培养是必须的（哺乳动物细胞贴壁培养时，使用饲养层细胞来支持或滋养干细胞生长）。但是按照这样的条件，在培养中会造成一个很大的问题，即无法做到标准化地诱导干细胞分化为神经细胞。简单地说，就是似乎是*同样的实验条件，但是分化诱导的结果大不相同。这样，是无法将获得的神经细胞用于后续的回输实验的，因为两次实验回输的细胞在生理状态上有明显的差别。

· 因此，发现一个标准化的、少用外源因子（饲养层细胞是使用很多的外源因子）的方法，是“体外干细胞向神经细胞分化"工作者必须解决的难题。

2. RHB-A和Neural Differentiation Medium NDiff 227培养基介绍

· 在2003年前，研究者发现在贴壁培养胚胎干细胞时，需要加入两种因子去诱导干细胞分化成为神经细胞，即N2和B27，其中Cellartis有N2添加剂。这两种因子现在已经成为神经分化实验中*的角色。

· 在2003年，苏格兰干细胞研究所的研究人员在Nature杂志上发表了一篇重要的研究报道，他们证明：

1）贴壁培养胚胎干细胞时，加入N2和B27后，超过半数的干细胞分化成为了神经前体细胞；

2）这个实验中，干细胞不形成聚落，单层生长。这个实验中外源因子很少，高度可控。因此，这个实验成为了体外诱导分化干细胞成为神经细胞的标准实验方案。这个培养基，就是Cellartis的Neural Differentiation Medium NDiff 227培养基。（conversion of embryonic stem cells into neuroectodermal precursors in adherent monoculture）。

· 2008年，Cellartis在Ndiff227培养基的基础上做了改进，研发出RHB-A培养基。葡萄牙的研究团队比较了Ndiff227和RHB-A两种培养基，发现贴壁培养干细胞诱导分化神经细胞的实验中，使用RHB-A培养基，形成神经细胞的数量比使用Ndiff227的情况多出10%以上。

· RHB-A和Ndiff227广泛应用于美国与欧州国家的科研实验中，有多篇文献可作为参考。

Neural Differentiation Medium NDiff 227仅供科研使用。

欢迎您致电咨询Neural Differentiation Medium NDiff 227 华雅再生医学旗舰公司：红荣微再（上海）生物工程技术有限公司  ：152 1681 4001。华雅再生医学-客服: 316 808 6348

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