本篇教你间充质干细胞培养基该如何制备
更新时间：2023-05-24 点击次数：1354次
间充质干细胞(MSCs)是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞，可用于许多治疗领域。为了研究和应用这些细胞，需要制备一种适合它们生长和增殖的培养基。以下是制备间充质干细胞培养基的步骤。
1.培养基配方的确定
间充质干细胞培养基的组成包括基础培养液和补充物两部分。基础培养液可以选择DMEM/F12、MEM或α-MEM等，其中含有必要的营养物质和缓冲剂，可以维持MSCs的基本生长需求。补充物可根据不同研究目的进行调整，常见的有10%胎牛血清(FBS)、5-20 ng/ml的人重组FGF、L-抗坏血酸酸钠(Vc)、牛血清白蛋白(BSA)等。在补充物选择上，注意避开对细胞有毒的成分。
2.消毒操作
将所有耗材(瓶盖、吸头、移液管等)在121℃高压蒸汽下灭菌30min以上，同时将操作台面、手套、药品瓶口用70%乙醇擦拭，避免细菌污染。
3.基础培养液的配制
按照培养基配方的要求称量并加入适量的无菌纯水，混合均匀后用0.22um滤器过滤灭菌。
4.补充物的添加
将经过消毒和质检的补充物根据所需比例加入到基础培养液中，同时通过滤器再次过滤消毒。
5.调节pH值
用NaOH或HCl等调节剂将培养基的pH值调至7.2-7.4，以确保MSCs在正常生理范围内生长。
6.分装与保存
将制作好的间充质干细胞培养基分装到无菌试管或瓶中，密封好后存放于-20℃冰箱中保存。使用前需要先解冻并加入适当的抗生素防止细菌污染。
总之，制备间充质干细胞培养基需要严格遵守消毒操作和培养基配方的要求，以确保培养基质量的稳定和可靠性。
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