在使用RNA提取试剂前有哪些注意事项呢
更新时间：2022-06-14 点击次数：1041次
TRIzon是广谱型总RNA提取试剂。实验操作快速方便，颜色鲜明，便于分层。本试剂适用范围广泛，可以从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。
样品在TRlzon中被充分裂解的同时能够最大限度地保证RNA的完整性。在加入氯仿离心后，溶液会分成三层:上层无色水相、中间层和下层红色有机相，RNA分布在上清层中。
收集上清层后，经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。提取的总RNA完整性好，无蛋白和DNA污染，可用于各种分子生物学常规实验，如RT-PCR.Real-time RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等。
下面让我们来了解一下使用RNA提取试剂前的准备事项吧:
1.预防RNase污染，应注意以下几方面:
1)使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5MNaOH中浸泡10分钟，用水*冲洗后高压灭菌。3)配制溶液应使用无RNase的水。
4)操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勘换手套。2.提取的样品避免反复冻融，否则影响RNA提取得率和质量。
3，本品中含有苯酚，具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护物品，如手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触到眼睛，应立即用大量的水冲洗并前往医院治疗。
4.样品用TRIzon匀浆后，如不即刻加入氯仿，置于-70°℃下可放置一个月以上。
5，保存在75%乙醇中的RNA沉淀，2-8C可以保存一周，-20C条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短，容易降解，建议提取后尽快进行后续实验，如反转录成cDNA，Northern Blot等。
6.若下游实验对DNA非常敏感，建议用不含RNase的DNasel(货号:CW2090A)对RNA进行处理。
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