本篇告诉你如何使用人外周血淋巴细胞分离液
更新时间:2022-01-12 点击次数:903次
人外周血淋巴细胞分离液为带有乳光或微乳光的灭菌水溶液。主要成分是Ficoll 400与泛影酸葡甲胺。适用于从血液分离所需细胞,在医疗和医学生物学研究中广泛应用。
其他人及动物多种比重细胞分离液。注:因不同种属不同比重分离液的细胞离散系数及细胞带电不同,所以用户在定制分离液时应提供所需分离液的比重、动物的种属及被分离细胞的名称。
下面让我们一起来了解一下人外周血淋巴细胞分离液的使用方法与注意事项吧
取新鲜抗凝血1ml,与全血及组织匀浆稀释液(Cat#:2010C1119)液1:1 混匀后,小心加于2ml的细胞分离液之液面上,以1500-2000转/分离心(半径15cm水平转子)15分钟,此时离心管中由上至下细胞分四层。
一层;为血浆层。
第二层;为环状乳白色淋巴细胞。
第三层;为透明分离液层。
第四层;为红细胞层,收集第二层细胞放入含细胞洗涤液(Cat#:2010X1118)4-5毫升的试管中,充分混匀后,以1500-2000转/分离心10-30分钟。沉淀经反复洗2次即得所需细胞。(此方法效果较好,推荐使用)
注意事项
1. 启封后应置4℃保存避免微生物的污染。
2. 细胞分离液从冰箱取出后,不可立即使用,需待溶液温度升至室温时,摇匀后使用。
3. 整个分离过程中,温度应控制在18-28℃且在无菌环境下,避免微生物的污染,否则会影响分离质量。
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