了解一下重组蛋白的获取途径及表达系统分别是什么
更新时间：2020-07-15 点击次数：2514次
今天让我们来了解一下重组蛋白的获取途径及表达系统分别是什么吧。
重组蛋白的产生是应用了重组DNA或重组RNA的技术从而获得的蛋白质。体外的生产主要包括四大系统:原核蛋白表达，哺乳动物细胞蛋白表达，酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。
获得途径：
重组蛋白需要使用表达系统来对其进行制备，其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术，获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体，之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。
体外重组蛋白的生产主要包括四大系统：原核蛋白表达(常用的大肠杆菌蛋白表达)，哺乳动物细胞蛋白表达(常用的细胞CHO，HEK293)，真核表达系统(酵母)及昆虫细胞蛋白表达。合适表达系统的选择取决于重组蛋白的特性、预期应用以及该系统能否生产足够量的蛋白质，根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统，提高表达成功率。
表达系统：
(1)目前应用广泛的表达系统有三大类，大肠杆菌(Esherichia coli)表达系统、酵母表达系统、CHO细胞表达系统。其中，大肠杆菌是表达重组蛋白常用的宿主菌，已应用于许多具有重要药用价值蛋白的生产。
大肠杆菌表达系统具有许多优点，如生长快、培养成本低廉、遗传背景清楚和易实现高密度培养等。大肠杆菌DH5α是一种诱变菌株，主要表现对外源DNA的免疫缺乏。大肠杆菌DH5α是基因工程常用的宿主菌之一，相比于正常菌种缺少了一定的免疫机制。
(2)不同的表达系统和培养方法显著影响下游的处理过程，目标蛋白表达是否形成包涵体，目标蛋白表达的定位(胞内、细胞膜内、周质空间和胞外)，蛋白表达的量都依赖于所选择的的表达系统。
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