有冷冻就有解冻,了解一下冻存管的解冻步骤吧
更新时间:2022-09-22 点击次数:1993次
冻存管有IATA航空运输协会标准测试证书,常规储存细胞培养物,组织样品,微生物样品(如病毒,细菌,酵母,真菌,孢子等),人源或动物源其它生物样品(如血液,血清,精液,抗体,RNA,DNA和蛋白样本),不适合存储再生医学样本。
解冻步骤
1、从液氮罐取出冻存的细胞后立即置于37℃水浴摇晃冻存管1-2分钟。解冻过程需要越快越好。
2、转移解冻的细胞于15mL离心管,立即用大量的含有血清的细胞培养基混匀。
3、500xg离心细胞5分钟,去除上清液,用适量的含有血清的细胞培养基重新悬浮细胞,然后转移到细胞培养瓶。
4、按照建议的细胞浓度接种。
5、接下来的12小时细胞进入静默期。
6、间隔24小时和48小时更换培养基
下面让我们来了解一下冻存管在使用时有哪些注意事项吧
冻存管用来存储样品,只能置于液氮气相或冰箱。禁止冻存管浸没于液氮液相,否则液氮可能渗入冻存管。因此,解冻时,蒸发的液氮产生高压力,最终导致冻存管炸裂,并且还将导致感染物质释放。
因此,操作冻存管时需要佩戴合适的个人安全防护措施,如穿戴安全防护服、佩戴护目镜、在安全橱操作。
进行冷冻保存时,冻存管需要缓慢地降温至冷冻温度。如果不是缓慢地降温到冷冻温度,将导致冰塞形成(如在冻存管顶部),冰塞将阻碍液体形成凝固,将导致高压力危险和后续的爆管风险。
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