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动物细胞培养需要的一些特殊条件
更新时间:2022-02-16   点击次数:3696次
①加胎牛血清培养基:  
动物细胞离体培养常常需要血清。各种细胞合成培养基(如MEM、RPMll640、DMEM)只提供细胞生长所需的各种基础营养物质,包括碳水化合物、氨基酸、无机盐、维生素等。血清提供生长必需因子,如激素、微量元素、矿物质和脂肪。根据不同细胞的需求,一般含有10%~20%的血清培养基即可维持细胞较快的生长增殖速度。  
②无菌环境:  
无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。使用的各种试剂和耗材要经过高压或紫外线灭菌。严格的无菌操作是养好细胞的必要前提。为防止细胞受到微生物感染,可在培养基中加入双抗。  
③温度和气体环境:  
一般动物细胞在体外培养的适宜温度是37℃,不适宜的环境温度会影响细胞的生长甚至死亡。二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节,一般维持在5%。二氧化碳既是细胞的代谢产物,又与维持培养液的pH密切相关。  
如何防控污染:保持良好的操作习惯,超净台要紫外灭菌30min,以70%的乙醇擦拭无菌操作台,开启超净台风扇运转数分钟后,才开始实验。  
每次只处理一种细胞,以免失误混淆或细胞间污染,操作不要触碰吸管尖头部或容器口等。  
像对待孩子一样养细胞,它很脆弱,最好每天关注一下,以免出现培养箱缺二氧化碳,停电、温度不够等现象。  
避免全军覆没,好细胞要及时保存,有备用的细胞,这样即使有细胞污染还可以有备用的细胞顶上,不至于太恼火,好习惯要保持。  
不同细胞喜好不同,需要在培养中慢慢体会,例如平滑肌细胞比较好长,2-3天可能就会有很多细胞,应该算是比较好养活的;内皮细胞分泌物较多,需要时不时换洗才会长的好等等。

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