血清储存以及解冻注意事项
更新时间：2021-12-07 点击次数：9694次
需要长期保存的血清必须储存于-20℃至-70℃低温冰箱中，4℃冰箱中保存时间切勿超过一个月。
由于血清结冰时体积会增加约10%，因此，血清在冻入低温冰箱，必须预留定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
瓶装血清解冻需采用逐步解冻法：
1、-20℃至-70℃血清低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天；
2、然后移入室温或者可以置于37℃水浴中，不断摇动待全部溶解后再分装。
注意：
1、在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀（小心勿造成气泡），使温度与血清成分均一，减少沉淀的发生；
2、切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀；
3、若一次无法用完一瓶，无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。
1）血清化冻为什么是浑浊的？
血清制备过程中会保留部分纤维蛋白原，化冻过程中纤维蛋白原可转化为纤维蛋白，使血清中出现浑浊，絮状物。这种情况不影响血清的功效。
血清化冻过程中，在37℃水浴中放置时间过长，也会导致沉淀产生，沉淀物包含磷酸钙结晶。沉淀物也不影响血清功效。
去除方法：
可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，将上清液加入培养基内一起过滤。也可直接过滤血清以去除这些絮状物。
2）血清热灭活（除非必须，一般不建议作此热处理）
血清为何要灭活？
血清热灭活是将血清置于56℃水浴至*解冻。可灭活其中补体系统中具有蛋白酶活性的成分。补体是免疫系统的成分。对于那些培养困难的细胞、用于病毒检测的细胞、用于细胞毒性检测很重要，可避免补体带来的不利影响。单热灭活也破坏血清中的生长因子，所以除非必需，血清才灭活处理。
启动的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，启动淋巴细胞和巨噬细胞活化。在免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。
血清灭活的正确方法
(1)按照前面的介绍正确化冻；
(2)水浴预热56℃。水量要足够，水深要超过瓶中血清的高度；
(3)轻轻摇动已解冻的血清，置于水浴中，水位可能会下降；
(4)待水温重新到56℃时，再计时30分钟；
(5)从水浴中拿出血清，待冷却。-20/-70℃存放。
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