以下介绍了一些非常常见的的移液技巧错误以及避免方法。
常见错误
1.错误的吸头入液深度
正确的入液深度多可使准确度提高5%。微量移液器的吸头入液深度应当为1-2mm,大量程移液器的吸头入液深度为3-6 mm,具体取决于吸头大小。如果吸头入液太深,那么吸头中的气压会增大,导致吸入过多的液体。
2.不正确的移液角度
移液器吸头在样品中的入液角度应当尽量接近90度,与重直方向偏离不超过20度。角度太大可能导致吸头中吸入太多的液体,造成吸液不准确。例如,在与重直方向呈30度角时,可过多吸入达0.7%的液体。
3.分液不统一
通过确保后剩余的液滴*分液而非依附到吸头前端,从而获得准确性和样品之间的可再现性。 对于绝大多数应用,建议用吸头前端沿着容器壁进行分液,因为这可减少或消除残留在吸头里的样品量。该技巧可提高1%或更高的准确性。
4.错误润洗
用移液器分液液体时,会在吸头内壁覆有一层液体,结果使排出的液体量稍微少于所要求的量。用将要使用的液体预先润洗新吸头至少两次,调节好吸头内侧。
5.移液节奏不一致
所有的样品之间都应保持一致的移液节奏。避免匆忙或快速的操作,要掌握移液过程中每个步骤的节奏。
移液器使用注意事项
(1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
(2)为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层“液膜”,造成排液量偏小而产生误差。
(3)浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
(4)可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL蒸馏水20时重0.9982g。
(5)移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的,长期操作会使内部零件松散而损坏移液器。
(6)移液器未装吸头时,切莫移液。
(7)在设置量程时,请注意?旋转到所需量程?数字清清楚楚在显示窗中?所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程,否则会卡住机械装置,损坏了移液器。
(8)移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如,浓酸、浓碱、有机物等)。
(9)严禁使用移液器吹打混匀液体。
(10)不要用大量程的移液器移取小体积的液体,以免影响准确度。同时,如果需要移取量程范围以外较大量的液体,请使用移液管进行操作。
以上常见的错误使用真的会导致实验结果出现失误,除了操作问题,当然质量较好的移液器有些可以避免这些问题的错的发生。所以今天给大家推荐美国RAININ公司一些移液器及特殊的吸头。
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