一起来了解一下该如何正确的使用SFM无血清培养基
更新时间：2020-03-27 点击次数：3460次
今天让我们一起来了解一下该如何正确的使用SFM无血清培养基吧
目前，血清仍是动物细胞培养中基本的的添加物，尤其是在原代培养或者细胞生长状况不良时，常常会先使用有血清的培养液进行培养，待细胞生长旺盛以后，再换成无血清培养液。
细胞转入无血清培养基培养要有一个适应过程，一般要逐步降低血清浓度，从10%减少到5%，3%，1%，直至无血清培养。在降低过程中要注意观察细胞形态是否发生变化，是否有部分细胞死亡，存活细胞是否还保持原有的功能和生物学特性等。
在实验后这些细胞一般不再继续保留，很少有细胞能够长期培养于无血清培养基而不发生改变的。细胞转入无血清培养之前，要留有种子细胞，种子细胞按常规培养于含血清的培养基中，以保证细胞的特性不发生变化。
为了使细胞适应无血清培养，关键的是使所培养细胞:
1.处于对数生长中期
2.>90% 活细胞率
3.适应时以较高的起始细胞接种
细胞适应无血清培养基的方法
1.直接适应--细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基(SFM)中。
一些类型细胞可直接从包含血清的培养基适应无血清培养基。对于直接适应，接种细胞密度应该:2.5×10~3.5×10细胞/ml。当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml时，传代培养细胞。当细胞密度在培养4到7天后达到2×10~4×10细胞/ml时，细胞*适应了无血清培养基。每隔3~5天，当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml，细胞活率在90%时，贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养。
2.连续适应--分好几步把细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基(SFM)中，与直接适应相比较，连续适应趋向对于细胞更加温和一些。
(1)以2倍正常接种密度接种生长活跃的细胞培养物到75%有血清培养基:25%SFM 混合培养基中，传代培养。
(2)当细胞密度>5×10细胞/ml时，以2×10到3×10细胞/ml细胞密度，在有血清培养基:SFM为50∶50的混合培养基中传代培养。
(3)以2×10到3×10细胞/ml细胞密度，25%有血清培养基和75% SFM中传代培养。
(4)当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml(接种后4到6天)，在100%SFM培养基中传代培养。
(5)每隔3到5天，当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml，细胞活率在90%时，贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养。
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