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细胞培养常见问题解答(FAQ)
更新时间:2019-04-17   点击次数:2228次

细胞培养相关问题:

1 冷冻管应如何解冻?

 

取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化, 并注意水面不可超过冷冻管盖沿, 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。

 

2 细胞冷冻管解冻培养时,是否应马上去除DMSO?

 

除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外,绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞),在解冻之后,应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中,待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。

 

3 可否使用与原先培养条件不同之培养基?

 

不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活。

 

4 可否使用与原先培养条件不同之血清种类?

 

不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。

 

5 何谓FBS,FCS,CS,HS?

 

FBS(fetal bovine serum)和FCS (fetal calf serum)是相同的意思,两者都是指胎牛血清,FCS 乃错误的使用字眼,请不要再使用。CS(calf serum)则是指小牛血清。HS(horseserum)则是指马血清。

 

6 培养细胞时应使用5%或10%CO2?或根本没有影响?

 

一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH 的缓冲系统,而培养基中NaHCO3 的含量将决定细胞培养时应使用的CO2 浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7 g时,细胞培养时应使用10 % CO2;当培养基中NaHCO3为每公升1.5g时,则应使用5 %CO2培养细胞。

 

7 何时须更换培养基?

 

视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上之更换时间,按时更换培养基即可。

 

8 培养基中是否须添加抗生素?

 

除于特殊筛选系统中外,一般正常培养状态下,培养基中不应添加任何抗生素。

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