无血清冻存液的使用方法分享
更新时间:2019-02-19 点击次数:3129次
无血清冻存液,通用于各种动物细胞株。特别配方具有有效提高细胞冻存活率和复苏活力。不含动物来源性蛋白,能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染,确保冻存细胞安全。既适用于一般培养细胞的冻存,也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。
那么下面我们就来分享一下无血清冻存液的使用方法,一起来看看吧。
一、冻存液成分
无血清细胞,无血清干细胞及MSC冻存液
无血清冻存液的保存条件
储存于4℃以下。质量保障期从产品的生产日期起,为期3年。3个月以上没有使用冻存液计划时,尽可能冷冻保存。为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低,推荐将100 ml产品分装小瓶后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。
二、无血清冻存液的使用方法
选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。
1.按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。
2.按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。
(参考:5×105至5×106 cells/ml)。
3.取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量,置于离心管中,离心收集培养细胞(参考离心条件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min)。移去离心管中的上清液。
4.加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度为5×105至5×106 cells/ml。缓慢地混合均匀,制成细胞混合液。
5.将离心管中的细胞混合液分装于已标示*的冷冻保存管中。
6.直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃冰箱,长期冷冻保存。
7.若研究者需要液氮保存时,可将*冻结的冻存管(放入-80℃冰箱后至少一昼夜)移至-196℃液氮罐。
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