微量混合DNA是法医DNA检验的难题,因为对多人混合的DNA图谱进行拆分比较困难。分离单细胞后检测全基因组DNA可以避免处理混合DNA。
单细胞通过二代测序检测DNA的方法流程:
细胞分离、裂解、单细胞全基因组扩增和二代测序。
目前,已有多种以单个基因组为模板的全基因扩增技术,包括
寡核苷酸引物 PCR 技术(degenerate oligonucleotideprimed PCR, DOP-PCR)
多重置换扩增技术(multipledisplacement amplification, MDA)
多次退火环状循环的扩增技术(multiple annealing and looping-based amplification cycles, MALBAC)
PicoPLEX技术相比这些WGA技术,具有zui高的可重复性。
WGA:whole genome amplification,全基因组扩增技术
参考文献:
单细胞分离检验技术在法医学中的应用研究
丰 蕾 1,杨 帆 2,李彩霞 1,徐 珍 1,凃 政 1,李万水 1,胡 兰 1,*
刑事技术 2015 年 第 40 卷 第 5 期
PicoPLEX® WGA Kit单细胞全基因组扩增试剂盒介绍
英文名称:Rubicon PicoPLEX WGA Kit
中文名称:Rubicon PicoPLEX单细胞全基因组扩增试剂盒
品牌:Rubicon Genomics
货号:R30050或RB3050(TAKARA版)
从单细胞中扩增DNA构建高重复性的文库现在成为可能!PicoPLEX WGA kit采用技术,设计、优化用于从单细胞中扩增单拷贝基因组DNA。便捷的单管操作流程减少了手动操作的失误,缩短了获得结果的时间并降低背景。PicoPLEX WGA Kit同样也可用于6 pg至50 pg的纯化gDNA,并兼容微阵列比较基因组杂交(array CGH)分析及PCR。
华雅旗下红荣微再主营医疗核酸保存文库扩增等产品,授权代理(上海)Rubicon Genomics单细胞文库扩增试剂。