微阵列（arrays）分析是zui广泛使用的PGS技术。

PicoPLEX全基因组扩增技术已经成为PGS的标准扩增技术。

植入前基因筛查和诊断（PGS，PGD）指体外受精（IVF）过程中所做的胚胎或卵母细胞测试，以便选择没有染色体变异或带有家族遗传疾病等位基因的胚胎，提高怀孕成功率，降低特定遗传病的传递风险。微阵列分析是IVF机构zui常用的PGS技术，应用PicoPLEX技术的好几种试剂盒被广泛使用。包括Illumina’s 24Sure 微阵列（原 BlueGnome’s 24Sure）, Perkin Elmer’s KaryoLite BoBs developed for PGS和 Oxford Gene Technology’s CytoSure™ 微阵列。不过实验室研究趋向是使用低深度的新一代测序（NGS）替代微阵列，PicoPLEX DNA-seq正好满足这种需求。

植入前基因筛查诊断流程

首先从受精卵吸取一个极体或者从受精后第三天的5到10个胚胎细胞吸取单细胞。裂解细胞后，释放出来的DNA进行扩增，所得产物标记后与含有目标基因组的微阵列杂交。分析软件会识别出拷贝数变异。具有高稳定性和可再现性，PicoPLEX全基因组扩增技术已经成为PGS的标准扩增技术。这一技术也适用任何单细胞样品和皮克级纯化DNA的基因特征分析。

胚胎细胞（极体 卵裂 囊胚）——PicoPLEX试剂（裂解扩增DNA）——微阵列杂交——染色体变异分析

PicoPLEX技术

PicoPLEX使用非互补引物进行随机引物延伸，所得文库系统偏差高，而随机偏差极低。

引物特点：随机引物延伸和非互补引物

文库特征：高系统偏差 低随机偏差

* US patent 7,803,550 and EP1924704

PicoPLEX® WGA Kit

植入前基因筛查（PGS）PicoPLEX®单细胞扩增试剂盒

从单细胞中扩增DNA构建高重复性的文库现在成为可能。PicoPLEX WGA kit采用技术，设计、优化用于从单细胞中扩增单拷贝基因组DNA。起始量低至单细胞或6pg基因组DNA。便捷的单管操作流程减少失误，节省时间并降低反应背景。

PicoPLEX WGA Kit兼容微阵列比较基因组杂交（array CGH）分析及PCR平台，被试管婴儿行业供应商如BlueGnome信赖并用于PGS/PGD。

操作流程

单管，三步。在1个PCR管或微孔中3个小时即可完成。无需样品纯化和转移过程，降低了样品损失，避免了操作污染和操作误差。

单细胞扩增再现性良好

肿瘤细胞经流式细胞术分选后，采用PicoPLEX WGA Kit 扩增。每个细胞（蓝色曲线）扩增比率相同，并且预期产量相同。不含细胞的样品（绿色曲线；空白模板对照）显示非常低的背景。

适用CNV分析

CNV（拷贝数变异）分析：单个卵裂球样品采用PicoPLEX WGA Kit扩増，标记后与BlueGnome®24sure® arrays杂交（Genesis Genetics Institute），结果清晰地显示了拷贝数变异。2011年ESHRE （欧洲人类生殖与胚胎学会）的临床实验证明了采用PicoPLEX 技术进行人类染色体核型分析的准确性。

PicoPLEX技术

技术优势：利用特殊随机引物（Quasi-random primer）引发线性扩增进行全基因组扩增。

相比于以往的PCR、MDA、MALBC为基础的单细胞全基因组扩增技术，操作简单快速。扩增zui大优势：再现性良好。

PicoPLEX技术：单细胞在单管或单孔中裂解。在预扩增过程中，特殊随机引物与基因组DNA结合延伸，形成发夹结构文库，在接下来的扩增中，只有发夹结构的文库被扩增。

（中文版：单细胞 细胞裂解 模版DNA 变性与回收模版 退火引物 引物延伸 变性与引物重连 延伸；茎环形文库收集 扩增

*步：细胞裂解；第二步：预扩增 采用特殊随机引物选择性结合基因组DNA后进行扩增；第三步：扩增 使用含有illumina index的引物进行扩增）

应用

拷贝数变异分析-CNV（aCGH）

单核苷酸多态性分型-SNP

基因突变筛查-PCR

不能直接应用NGS，PicoPLEX DNA-seq Kit可以直接应用NGS。

扩展产品

PicoPLEX DNA-Seq (Picoseq) 技术在PicoPLEX WGA技术的基础上发展，扩增部分与PicoPLEX类似，但是在扩增的第二步，会加入Illumina接头和index（条形码）。

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