Corning NK 细胞活化扩增套装和竞争产品的比较
Corning® NK细胞活化扩增培养套装支持NK细胞的快速扩增，NK细胞产量高（约8.6 万亿，扩增290倍），细胞杀伤力强（效应细胞：靶细胞=5:1 下杀伤力77.9%），与竞争产品相比很有优势。
比较项目 | 竞争产品B： NK 试剂盒 | 竞争产品C： NK 培养基 | |
接种容器 | 预包被T-75培养瓶 | 提供包被剂 | 没有提供培养瓶和包被剂 |
组份 | Pre-coated T-75 flask 抗体预包被T75细胞培养瓶 50 mL NK细胞活化培养基 1.8 mL NK细胞活化添加剂 1L NK细胞扩增培养基 | 1mL包被剂 80mL活化培养基 2 L扩增培养基+1 mL 添加剂 | 500mL 培养基/瓶 |
操作友好度 | 方法清除，操作简单 | 没有zui终方法，NK培养需要自行优化 | 没有方法 |
抗凝剂兼容性 | 肝素，柠檬酸钠 | 肝素 | 肝素，柠檬酸钠 |
细胞产量（14天，30mL 血样） | 约 3 万亿 | 约 0.64万亿 | 约 4.2 万亿 |
扩增倍数 | 约100倍 | 约32倍 | 约140倍 |
CD3-CD56+表型，14天 | 83% | 68% | 6% |
NK效应细胞数量 | 约2.5万亿 | 约0.4万亿 | 约0.3万亿 |
细胞杀伤力（ET=5:1，靶细胞K562） | 77.9% | 54.1% | 57.6% |
培养体积 | 1.5L | 1.0L | 1.0L |
周期 | 14天 | 14天 | 14天 |
Corning NK 细胞活化扩增套装可以用于NK细胞的大量扩增，并且具有高活力和高杀伤能力。Corning NK 细胞活化扩增套装饱和预包被T-75培养瓶，KBM NK活化培养基，KBM NK活化添加剂和KBM NK扩增培养基。前三个特别设计用于NK活化，zui后一个KBM NK扩增培养基于NK细胞扩增。NK活化培养基和扩增培养基生产都是使用高质量试剂和cGMP级的原料。培养基唯二所含培养基是注射级的血清白蛋白和重组人胰岛素。
介绍
自然杀伤细胞（NK）是重要的免疫细胞，能识别并清除肿瘤和病毒感染。体外大量培养NK细胞，满足过继性免疫治疗所需一向比较困难。据资料，现有的培养方法都是采用扩增培养基搭配细胞因子（IL-2，IL-7，IL-15）的方案，需要研究者自行优化后使用。
Corning NK 细胞活化扩增套装提供了NK 细胞活化扩增的全套材料和标准操作方法，所得NK细胞扩增能力强，活性和杀伤能力高。研究者无需优化，而且使用步骤精简。和竞争产品比较了NK细胞产量，活力和NK 细胞体外 阳性表达比率和杀伤能力。
鉴定方法
免疫表型
收获细胞表面标记表达评估方法：CD3-CD56+阳性率。
100 μL PBS 加入 1 x 106 个细胞，CD3 FITC +CD56 PE抗体染色 20min，染色过程 室温避光。孵育后，PBS 缓冲液清洗细胞，200 μL PBS 重悬，用于流式细胞分析。每个样本收集1万个events，再用histogram overlay subtraction method using BD Accuri C6 软件。
CCK-8 细胞毒性检测
K-562 细胞作为靶细胞。1 x 105 cells/mL的K-562 细胞和 5 x 105 cells/mL的效应细胞共培养（96孔培养板三份，终体积200 μL/孔），37°C 过夜。分析前，每孔添加20 μL细胞计数试剂（ Cell Counting Kit-8 solution ，CCK8, Sigma Cat. No. 96992）， 37°C ，5% CO2孵育1 h。数据读取：SpectraMax® M4 (Molecular Devices) multifunction microplate reader。
结果
图1 使用不同品牌的NK扩增试剂盒比较细胞生长曲线和扩增能力。与竞争产品B，C相比，Corning® NK细胞活化扩增培养套装扩增能力具有优势。
图2 CCK-8 细胞杀伤活性检测。NK细胞与K-562细胞共培养16 h后（效应细胞：靶细胞=5:1 ），Corning® NK细胞活化扩增培养套装培养的NK 细胞杀伤能力77.9%，比竞争产品B (54.1%) 和C(57.6%) 有优势。
图3 流式细胞分析NK细胞表面标志物。使用CD3-CD56+阳性率评估收获细胞中NK细胞占比。Corning® NK细胞活化扩增培养套装占比83.0%，高于竞争产品B (67.6%)和C(6.4%)。
结论
Corning® NK细胞活化扩增培养套装支持NK细胞的快速扩增，NK细胞产量高（约8.6 万亿，扩增290倍），细胞杀伤力强（效应细胞：靶细胞=5:1 下杀伤力77.9%），与竞争产品相比很有优势。
Corning NK 细胞活化扩增套装提供了NK 细胞活化扩增的全套材料和标准操作方法。无需优化，而且使用步骤十分精简。
原文：Zhu Xuejing, Liu Jian Corning Incorporated
Corning Life Sciences Asia Technology Center Shanghai 201206, China
