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技术支持

核酸保存纯化:Streck 采血管和QIAamp核酸纯化试剂盒
更新时间:2018-01-29   点击次数:1533次

对孕妇外周血中游离 DNA 进行高通量测序(Next Generation Sequencing, NGS),并分析孕妇外周血中携带的胎儿的染色体突变异常风险,特别是染色体非整倍体变异的检测,是近几年出现的无创产前筛查(NIPT)新技术

 

NIPT产品

基于孕妇游离DNA的胎儿染色体非整倍体检测(高通量测序法)流程及产品

血液标本采集、运输、保存

血浆游离DNA提取纯化

血浆游离DNA基因文库构建

文库产物纯化

基因测序

 

血液标本采集、运输、保存

Streck Cell-Free DNA BCT® 血浆游离DNA采血管

产品英文名称:Streck Cell-Free DNA BCT® BLOOD COLLECTION TUBE

产品中文名称:Streck BCT® 血浆游离DNA采血管

货号:218962,230253

 

Streck 血浆游离DNA采血管是一种直接提取的全血收集管,用于收集、运输和储存血液样本。Streck 血浆游离DNA采血管内含防腐剂,它能稳定有核血细胞,防止细胞基因组DNA的释放,保护血浆游离循环DNA:cfDNA ctDNA和循环肿瘤细胞(CTC)。

230253是218962的升级版,是Streck公司新推将玻璃和塑料的*性能融合在一起的Fusion2TM混合塑料管

 

成份

Streck 218962包含抗凝K3EDTA和细胞液体防腐剂

 

材质

Streck 218962管材是玻璃,Streck 230253管材是一种特制的混合塑料Fusion2,兼具玻璃的*优点和塑料的安全性。

         

品牌

货号

产品描述

包装

Streck

218962

Cell-Free DNA BCT® BLOOD COLLECTION TUBE

Cell-Free DNA BCT®血浆游离DNA采血管

100管/盒

Streck

230253

Cell-Free DNA BCT® BLOOD COLLECTION TUBE

Cell-Free DNA BCT®血浆游离DNA采血管(混合塑料)

100管/盒

 

 

血浆游离DNA提取纯化

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit 循环核酸纯化试剂盒

货号: 55114 品牌:Qiagen

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit (50)

For 50 preps: QIAamp Mini Columns, Tube Extenders (20 ml), QIAGEN Proteinase K, Carrier RNA, Buffers, VacConnectors, and Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml)

样品处理量:5mL

洗脱体积:20-150μL

可以洗去PCR抑制物,如:二价阳离子和蛋白

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit核酸纯化试剂

从人类血浆或血清中浓缩和纯化游离DNA和RNA

 

浓缩的核酸,高上样量,低洗脱体积

回收DNA和RNA碎片

无需有机提取或乙醇沉淀

*去除污染物和抑制剂

 

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit核酸纯化试剂盒大大简化了从血浆或血清中浓缩和纯化游离DNA和RNA的过程。

 

性能

分析血液中肿瘤特异性的胞外DNA片段和mRNA可对普通血液样品进行特异性地肿瘤类型检测。这些存在于血清或血浆中的游离核酸通常都是<1000 bp(DNA)或<1000 nt(RNA)的片段。此外,小至21 nt的miRNAs可作为某些癌症和疾病状态的生物标记。

 

经纯化和浓缩的游离DNA和RNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质,可即用于各种下游应用,包括:

PCR 和定量real-time PCR以及RT-PCR

用于基于血液样品的癌症生物标记的研究、验证和检测

病毒核酸检测

 

原理

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit核酸纯化试剂盒简化了从血浆或血清中纯化游离DNA和RNA的过程。核酸特异性结合到QIAamp Mini离心柱上,污染物流走。PCR抑制物,如:二价阳离子和蛋白,可通过三步有效的洗涤步骤被*去除,结合在离心柱上的纯核酸可用水或试剂盒中的缓冲液洗脱。使用QIAamp Circulating Nucleic Acid技术从人类血浆、血清或尿液中获得游离的DNA和RNA。

 

应用

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit核酸纯化试剂盒可从含低浓度DNA和RNA碎片的原始样本(人血浆中常规游离DNA的浓度为1–100 ng/ml)中纯化和浓缩游离的DNA、RNA、miRNA,包括病毒核酸。起始样本体积至多5 ml。

 

适用样本

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit核酸纯化试剂盒可从以下样本类型中纯化和浓缩核酸:

人类血浆

血清

尿液

 

NIPT介绍

NIPT发展

NIPT发展迅速,而且它还不是标准医疗项目,只是一个选择项目。

NIPT发展快速得异常,消费者在推进。可能原因:同步社交媒体发展,讨论较多。

NIPT应用

NIPT在实际运用中要解决的问题:

市场压力

专业指南的快速变化。高风险孕妇和一般孕妇做咨询用的时间都不一样。那么获得的信息也不同。孕妇查出有问题不一定要终止妊娠,还可以多做应对准备。而且做继续怀孕决定的比例达到了40%。

NIPS在产前检测中的准确定位。一开始定位是高危产妇,之后不是高危产妇也对NIPT有兴趣。中等风险妊娠群体的NIPT检测,还会再上升。

NIPT的检测

NIPT的检测还不是准确。

低风险用户越多,PPV值越低。

生物学原因导致的母体的miccroduplications也会影响检测结果。

NIPT和标准产前检测项目的比较

标准产前检测项目:血清生化检测和nuchal translucency超声波检查。

NIPT在在某些检测方面的错误率格外低,比如cfDNA阳性预测方面比标准项目做得好。

NIPT的可选项目:性染色体

常规染色体非整倍体异常项目:21- 三 体 综 合 征(trisomy 21,T21)、18-三体综合征(trisomy 18,T18)和 13-三体综合征(trisomy 13,T13)。

检测可选项目:性染色体等。NIPT能比超声波更早知道是否有性别染色体异常。

NIPT技术

美国NIPS的四个公司:4种技术。检测错误率差别较大。

Illumina:WGS 全基因组测序

Sequenom:WGS 全基因组测序

Ariosa Diagnostics:targeted approach on a microarray 微阵列靶向方法

Natera:targeted sequencing for SNP 靶向测序检测单基因

 

参考文献

1.染色体非整倍体无创产前检测技术质控要点及临床应用进展.曲守方; 于婷; 孙楠; 李丽莉; 陈芳; 吴英松; 黄杰.分子诊断与治疗杂志.

2.Cell-free DNA screening blooms in expansion to low-risk pregnancies,Anne Paxton,2017 Issues, ARTICLES, March 2017.

 

Streck 218962(现货),230253 Cell-Free DNA BCT采血管及更多无创产前检测产品欢迎您咨询华雅再生医学旗舰公司:红荣微再(上海)生物工程技术有限公司 红荣微再以“传递科学价值,服务科学研究”为宗旨主营干细胞、医疗、细胞治疗、器官再生四大板块的产品

 

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