染色体非整倍体是指相对于人正常的 46 条染色体而言,细胞中的某一条或几条染色体数目增加或减少。新生儿中染色体异常的发病率为1/160,其中 21- 三 体 综 合 征(trisomy 21,T21)、18-三体综合征(trisomy 18,T18)和 13-三体综合征(trisomy 13,T13)是3种zui主要常染色体非整倍体疾病。
对孕妇外周血中游离 DNA 进行高通量测序(Next Generation Sequencing, NGS),并分析孕妇外周血中携带的胎儿的染色体突变异常风险,特别是染色体非整倍体变异的检测,是近几年出现的无创产前筛查新技术。
由于基于 NGS 技术的 无创产前检测(NIPT)具有无创取样、无流产风险、高灵敏度、高准确性(≥99%)等特点,成为目前染色体非整倍体产前筛查与诊断技术的主要手段。
基于孕妇游离DNA的胎儿染色体非整倍体检测(高通量测序法)流程及产品
血液标本采集、运输、保存
血浆游离DNA提取纯化
血浆游离DNA基因文库构建
文库产物纯化
基因测序
外周血游离DNA标本采集、运输、保存
孕妇外周血血浆游离DNA采集:EDTA 抗凝管或者 Streck Cell-Free DNA BCT 管
Streck Cell-Free DNA BCT® 血浆游离DNA采血管
产品英文名称:Streck Cell-Free DNA BCT® BLOOD COLLECTION TUBE
产品中文名称:Streck BCT® 血浆游离DNA采血管
Streck 血浆游离DNA采血管是一种直接提取的全血收集管,用于收集、运输和储存血液样本。Streck 血浆游离DNA采血管内含防腐剂,它能稳定有核血细胞,防止细胞基因组DNA的释放,保护血浆游离循环DNA和循环肿瘤细胞(CTC)。
230253是218962的升级版,是Streck公司新推将玻璃和塑料的*性能融合在一起的Fusion2TM混合塑料管。
品牌 | 货号 | 产品描述 | 包装 |
Streck | 218962 | Cell-Free DNA BCT® BLOOD COLLECTION TUBE Cell-Free DNA BCT®血浆游离DNA采血管 | 100管/盒 |
Streck | 230253 | Cell-Free DNA BCT® BLOOD COLLECTION TUBE Cell-Free DNA BCT®血浆游离DNA采血管(混合塑料) | 100管/盒 |
EDTA抗凝管参见BD真空采血管分类 血清 血浆 单个核细胞 RNA 肝素 EDTA
血浆游离DNA提取纯化
磁珠法或离心柱法
离心柱法产品:
QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit 循环核酸纯化试剂盒
货号: 55114 品牌:Qiagen
QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit (50)
For 50 preps: QIAamp Mini Columns, Tube Extenders (20 ml), QIAGEN Proteinase K, Carrier RNA, Buffers, VacConnectors, and Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml)
样品处理量:5mL
洗脱体积:20-150μL
可以洗去PCR抑制物,如:二价阳离子和蛋白
血浆游离DNA文库构建
ThruPLEX® Plasma-seq Kit血浆游离DNA文库构建试剂
ThruPLEX® Plasma-seq基于ThruPLEX技术,并用于血浆来源cfDNA高品质NGS文库构建。该试剂专门针对cfDNA进行优化,在保持样本GC代表性的基础上,提升了文库的信息容量。文库构建后可用于CNV分析、全基因组测序分析或是采用一些panel针对目标区域进行捕获富集后的DNA分析,如Agilent SureSelect® and Roche NimbleGen SeqCap® EZ。
血浆样品采用ThruPLEX Plasma-seq试剂盒制备文库,能有更好的灵敏度、更准确的基因变异分析结果。与其它液态活检的样品一样,血浆由于其易获得、价值高的特点,深受研究肿瘤学或者孕妇血浆中胎儿游离DNA科研工作者的重视。
品牌 | Code No. | 包装量 |
Rubicon | R400490 | 12 Rxns |
Rubicon | R400491 | 48 Rxns |
Rubicon | R400492 | 96 Rxns |
文库产物纯化
Agencourt AMPure XP 核酸纯化试剂盒
Agencourt AMPure XP核酸纯化试剂盒是一种能够获得高质量DNA产物的纯化试剂盒,纯化后的核酸纯度高,无盐离子残留,无需离心或过滤,目前广泛应用于NGS文库构建。该试剂的应用为产物纯化,如:NGS文库构建过程中酶联体系的纯化、PCR产物纯化等。既可以手工操作,也可以使用自动化工作平台以96孔或384孔板的形式完成。
品牌 | 货号 | 产品名称 | 包装 |
BeckMan | A63882 | Agencourt AMPure XP核酸纯化试剂盒 | 450 mL |
基因测序
参考文献:
[1] 染色体非整倍体无创产前检测技术质控要点及临床应用进展.曲守方; 于婷; 孙楠; 李丽莉; 陈芳; 吴英松; 黄杰.分子诊断与治疗杂志.
[2] 基于孕妇游离DNA的胎儿染色体非整倍体检测试剂质量控制技术评价指南(高通量测序法)
Streck 218962血浆游离DNA采血管现货供应及更多无创产前检测产品欢迎您咨询华雅再生医学旗舰公司:红荣微再(上海)生物工程技术有限公司 :1500 1904 520。红荣微再-客服: 2395557778 经销商专员。红荣微再(上海)生物工程技术有限公司。红荣微再以“传递科学价值,服务科学研究”为宗旨,主营干细胞、医疗、细胞治疗、器官再生四大板块的产品。