CAR-T 治疗：T细胞分选EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit
免疫细胞治疗
人免疫系统（immune system）是防卫病原体入侵zui有效的武器，具有以下功能：
免疫防御：识别和清除外来入侵的抗原，如病原微生物等。
免疫监视：识别和清除体内发生突变的肿瘤细胞或其他有害的成分。
免疫自稳：识别和清除体内变性、衰老、死亡的细胞，维持体内环境相对稳定。
免疫细胞治疗是一种将患者自体的免疫细胞在体外培养、活化、扩增，再回输入患者体内，利用患者自身免疫细胞杀伤肿瘤细胞进行治疗的生物治疗技术。
免疫细胞治疗恶性肿瘤一直是医学界研究的热点，相对于传统肿瘤治疗（手术、化疗、放疗），优势已经越来越明显，在一些肿瘤疾病类型上，甚至已经取代传统的治疗手段，成为一线治疗方法，比如这几年的研究大热点CAR-T治疗，在治疗血液性肿瘤上面取得了突破性的成绩，国内外制药大公司注册的CAR-T临床试验高达百个。
免疫细胞
CAR-T细胞 NK细胞 CIK细胞
CAR-T免疫细胞治疗模式
CAR-T免疫细胞疗法流程的相关阶段
病人来源的T细胞样本（PBMC等）——T细胞分离分选——CAR-T细胞活化、扩增，基因工程改造——CAR-T细胞回输
CAR-T是一种通过基因工程改造T细胞对白血病的血液肿瘤细胞进行攻击的免疫疗法。截止去年十月，已有诺华和Kite两家公司获得FDA认证的唯二基因疗法。CAR-T免疫细胞疗法大热中。这两个临床成功的CAR-T疗法都对来自病人的外周血进行磁珠分选筛选T细胞。Stemcell的EasySep™人T细胞富集分选试剂盒可以用于CAR-T疗法的T细胞分选阶段（免疫磁珠细胞分选法）。EasySep™人T细胞富集分选试剂盒的磁珠分选采用负选方式，可以避免标记T细胞，以防标记抗体对T细胞造成伤害，zui大程度保持T细胞的untouched活性，立即用于下游CAR-T研究。
T细胞负选方案介绍
在负选时，非目标细胞通过针对细胞表面抗原的抗体被去除。负选试剂中的抗体组合确定哪些细胞被去除。
以下情况，比较适合负选：
需要未经标记的细胞
若将抗体结合到目标细胞上会造成抑制或活化，影响下游研究
目标细胞没有特异性抗体可用来标记
需要去除某些类型的细胞
EasySep™人T细胞富集试剂盒
EasySep™人T细胞富集试剂盒可用于从新鲜或冻存外周血单个核细胞中通过负选方式分离T细胞。不需要的细胞被识别非T细胞的四聚体抗体复合物（Tetrameric Antibody Complexes）和dextran包被的磁珠标记后移除。被标记细胞不需要过柱，使用EasySep™磁极就能简单分离。需要的细胞被倒到新管子。分离细胞可以立即用于下游：流式细胞术、细胞培养（CAR-T免疫疗法）或DNA/RNA提取。
推荐使用新版EasySep™人T细胞分选试剂盒（货号：17951），短至8分钟即可完成免疫磁珠细胞分选。
EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit targets non-T cells for removal with antibodies recognizing specific cell surface markers. Unwanted cells are labeled with antibodies and magnetic particles, and separated without columns using an EasySep™ magnet. Desired cells are simply poured off into a new tube. Isolated cells are immediay available for downstream applications such as flow cytometry, culture, or DNA/RNA extraction.
基本信息
中文名称 EasySep™人T细胞富集试剂盒
英文名称 EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit
用于标记1 x 109个细胞
EasySep™人T细胞富集试剂盒是套装，包含：
EasySep™ Human T Cell Enrichment Cocktail（1mL） T细胞富集抗体复合物
EasySep™ D Magnetic Particles（1mL） 磁珠
货号：19051
保存 2 - 8°C，不能冷冻。
EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit适用样本
EasySep™ Human T Cell Enrichment Kit可用于从各种样本来源中分选高纯度的人T细胞，包括：新鲜或冻存外周血单个核细胞（PBMCs）、白细胞单采术（Leuko Pak）样本。目标细胞被抗体复合物和磁珠标记，以进行负选。
CAR-T免疫细胞疗法相关产品
淋巴细胞分离液
GE Ficoll Paque淋巴细胞分离液是一种无菌、即用型的淋巴细胞分离液，根据外周血中各类细胞在密度梯度离心中呈现不同的密度梯度分布而将全血中的淋巴细胞等单个核细胞进行分离。适用人外周血、骨髓和脐带血的单个核细胞分离。Ficoll Paque PREMIUM经GMP认证，适合临床使用。
GE | 17-1440-02 | Ficoll Paque PLUS,1.078 g/ml淋巴细胞分离液 | 6×100 ml |
GE | 17-1440-03 | Ficoll Paque PLUS,1.078 g/ml淋巴细胞分离液 | 6×100 ml |
GE | 17-5442-02 | Ficoll Paque PREMIUM,1.078 g/ml淋巴细胞分离液 | 6×100 ml |
GE | 17-5442-03 | Ficoll Paque PREMIUM,1.078 g/ml淋巴细胞分离液 | 6×100 ml |
免疫磁珠分选
Stemcell免疫磁珠分选
品牌 | 货号 | 产品描述 |
Stemcell | 19051 | EasySep Human T Cell Enrichment Kit EasySep™人T细胞富集试剂盒 |
Stemcell | 17951 | EasySep™Human T Cell Isolation Kit，EasySep™人T细胞富集试剂盒的新版 |
Stemcell | 17851 | EasySep™ Human CD3 Positive Selection Kit II，T细胞正选 |
Stemcell | 18000 | EasySep™磁极 |
Stemcell | 20144 | EasySep™Buffer |
Miltenyi免疫磁珠分选
临床级CART制备方案
品牌 | 货号 | 产品描述 |
Miltenyi | 200-070-132 | CliniMACS CD4 Reagent CE |
Miltenyi | 200-070-115 | CliniMACS D8 Reagent |
Miltenyi | 200-070-119 | CliniMACS CD62L Reagent CE |
Miltenyi | 200-070-131 | CliniMACS CD25 Reagent, CE |
Miltenyi | 200-070-146 | CliniMACS CD45RA Reagent |
Miltenyi | 200-070-117 | CliniMACS CD19 Reagent, CE |
Miltenyi | 200-070-118 | CliniMACS CD14 Reagent, CE |
Miltenyi | 200-073-104 | CliniMACS Tubing Set, CE |
Miltenyi | 130-097-184 | CliniMACS Prodigy TS 510 for Research Use |
T细胞级亚群的分选
Miltenyi | 130-091-114 | CD2 MicroBeads, human | 2 mL |
Miltenyi | 130-050-101 | CD3 MicroBeads, human | 2 mL |
Miltenyi | 130-098-193 | MACSxpress Pan T Cell Isolation Kit | 1 kit |
Miltenyi | 130-096-535 | Pan T Cell Isolation Kit, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-091-264 | CD6 MicroBeads, human | 2 mL |
Miltenyi | 130-093-247 | CD28 MicroBead Kit, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-097-095 | Naive Pan T Cell Isolation Kit, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-045-101 | CD4 MicroBeads | 2 mL |
Miltenyi | 130-055-101 | CD4 Multisort Kit, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-096-533 | CD4+T Cell Isolation Kit | 1 kit |
Miltenyi | 130-045-201 | CD8 MicroBeads | 2 mL |
Miltenyi | 130-055-201 | CD8 Multisort Kit, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-096-495 | CD8+ T Cell Isolation Kit去除分选，untouched细胞 | 1 kit |
Miltenyi | 130-094-131 | Naive CD4+ T Cell Iso Kit II, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-091-758 | CD62L MicroBeads, human | 2 mL |
Miltenyi | 130-045-901 | CD45RA MicroBeads, human | 2 mL |
Miltenyi | 130-046-001 | CD45RO MicroBeads, human | 2 mL |
Miltenyi | 130-094-302 | CD4+ Central Mem T Cell Isoaltion Kit,human | 1 kit |
Miltenyi | 130-093-244 | Naive CD8+ T Cell Iso Kit, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-045-901 | CD45RA MicroBeads | 2 mL |
Miltenyi | 130-046-001 | CD45RO MicroBeads, human | 2 mL |
Miltenyi | 130-094-412 | CD8+ Memory T Cell Isolation Kit, human | 1 kit |
Miltenyi | 130-042-301 | MidiMACS™ Starting Kits，LS | 1 kit |
Miltenyi | 130-090-329 | MidiMACS™ Starting Kits，LD | 1 kit |
Miltenyi | 130-091-758 | CD62L MicroBeads | 2 mL |
Miltenyi | 130-091-221 | autoMACS® Running Buffer – MACS® Separation Buffer | 6×1.5 L |
Miltenyi | 130-091-222 | autoMACS® Rinsing solution | 6×1.45 L |
Miltenyi | 130-091-376 | autoMACS® Running Buffer – MACS® Separation Buffer | 6×75 mL |
激活：CAR-T细胞 CIK细胞
T细胞活化抗人CD3单克隆抗体（Functional，clone: OKT3）可以与TCR复合物结合，激活T细胞。SAFIRE(Sodium Azide Free Immensely Reduced Endotoxins) 类产品是BioGems品牌下的功能性抗体产品。
Dynabeads® Human T-Activator CD3/CD28 用于活化和扩增人 T 细胞和 T 细胞克隆，以作研究之用。Dynabeads® CD3/CD28 T Cell Expander 提供了活化和扩增 T 细胞的简单方法，无需抗原呈递细胞或抗原。 Dynabeads® Human T-Activator CD3/CD28 是均匀的 4.5 µm 超顺磁珠，与抗 CD3 和抗 CD28 单克隆抗体的优化混合物偶联。通过使抗 CD3 和抗 CD28 抗体与 Dynabeads® 结合，这种微珠可以提供 T 细胞活化和扩增所需的原始和共刺激信号。
RetroNectin®重组人纤维蛋白片段和CD3单克隆抗体（OKT3）两者共同作用可以刺激T细胞的增殖和分化。
品牌 | 货号 | 产品描述 | 包装 |
PeproTech/BioGems | 05121-25-500 | Anti-Human CD3 mAb （克隆号OKT3） | 500μg |
PeproTech/BioGems | 10311-25-500 | Anti-Human CD28 mAb（克隆号CD28.2） | 500μg |
GIBCO | 11131D | Dynabeads™ Human T-Activator CD3/CD28 磁珠 | 2 mL |
StemCell | 10971 | ImmunoCult™ Human CD3/CD28 T Cell Activator | 2 mL |
StemCell | 10970 | ImmunoCult™ Human CD3/CD28/CD2 T Cell Activator | 2 mL |
PeproTech | AF-200-02 | 重组人IL-2 (Animal Free) | 50ug/ 100ug |
PeproTech | AF-300-02 | 重组人IFN-γ(Animal Free) | 100ug |
品牌 | 货号 | 产品描述 | 包装 |
TAKARA | T100B | RetroNectin® Recombinant Human Fibronectin Fragment 重组人纤维蛋白片段 | 2.5mg |
TAKARA | T100A | 0.5mg | |
TAKARA | T201 | RetroNectin® Recombinant Human Fibronectin Fragment 重组人纤维蛋白片段，GMP级 | 2.5 mg 冻干粉 |
扩增：免疫细胞培养基
品牌 | 货号 | 产品描述 | 包装 |
Corning | 88-581-CM | KBM581, serum-free medium for DC and CIK DC/CIK 细胞无血清培养基 | 1 L/瓶 |
StemCell | 10981 | ImmunoCult™-XF T Cell Expansion Medium 无血清T细胞扩增培养基 | 500mL/瓶 |
TAKARA | GT-T551 H3 | 淋巴细胞、DC细胞、NK细无血清胞培养基 | 1000 ml |
检测
细胞增殖检测
品牌 | 货号 | 产品描述 | 包装 |
PeproTech/BioGems | 63310-00-500 | CFSE | 500 mg |
细胞凋亡检测
品牌 | 货号 | 产品描述 | 包装 |
PeproTech/BioGems | 60910-00 | Propidim Iodide Solution | 200 tests 500 tests |
PeproTech/BioGems | 61410-00 | 7-AAD Solution | 200 tests 500 tests |
慢病毒检测
TAKARA | 632200 | Lenti-X p24 Rapid Titer Kit慢病毒滴度测定 p24 ELISA 试剂盒 | 1 kit |
Gibco | 11913-019 | CD 293 无蛋白培养基 | 1000 mL |
CAR-T冻存
GMP级BioLife Solutions细胞冻存液
BioLife Solutions | 210102 | CryoStor CS10 Freeze Media 细胞DMSO冻存液
| 100 mL/瓶 |
BioLife Solutions | 202102 | CryoStor CS2 Freeze Media 细胞DMSO冻存液
| 100 mL/瓶 |
BioLife Solutions | 205102 | CryoStor CS5 Freeze Media 细胞DMSO冻存液
| 100 mL/瓶 |
细胞冻存袋
OriGen CryoStore 细胞冻存袋
品牌 | 货号 | 产品描述 | 包装 |
OriGen | CS25N | CryoStore 25 EVA 冻存袋，N型管路 | 24个/箱 |
OriGen | CS50 | CryoStore 50 EVA 冻存袋 | 24个/箱 |
OriGen | CS250 | CryoStore 250 EVA 冻存袋 | 24个/箱 |
OriGen | CS250N | CryoStore 250 EVA 冻存袋，N型管路 | 24个/箱 |
EasySep Human T Cell Enrichment Kit 订购信息
细胞类型 | 货号 | 产品名称 | 纯度 | 适用的染色抗体 |
T细胞 | 17951 17951RF | EasySep Human T Cell Isolation Kit EasySep™人T细胞分选试剂盒 | 96.7 ± 1.5% | CD2（货号#60007） CD3（货号#60011） CD4（货号#60016） CD8a（货号#60022） CD45（货号#60018） |
19051 19051RF | EasySep Human T Cell Enrichment Kit EasySep™人T细胞富集试剂盒 | 95.0 - 99.0% |
说明：RF：货号后加RF，比如17951RF，代表RoboSep™试剂盒：包含EasySep™分选试剂盒、RoboSep™缓冲液和1-2盒RoboSep™枪头。
分选试剂盒和富集试剂盒的主要区别：分选试剂盒是富集试剂盒的更新版，实验耗时更少。
EasySep Human T Cell Enrichment Kit 19051以及更多CAR-T免疫细胞治疗GMP级产品华雅再生医学旗舰公司：红荣微再（上海）生物工程技术有限公司 ：1500 1904 520。红荣微再-客服: 2395557778 经销商专员
红荣微再以“传递科学价值，服务科学研究”为宗旨，主营干细胞、医疗、细胞治疗、器官再生四大板块的产品。
