凝胶电泳原理
凝胶电泳(英语:Gel electrophoresis)或称胶体电泳,是一种用于大分子(如DNA、RNA、蛋白质)以及其碎片的分离、分析技术。该技术被科学工作者用于分离具有不同物理性质(大小、电荷、等电点)的分子。凝胶电泳通常用于分析用途,但也可以作为预处理技术,在进行质谱、聚合酶链式反应、克隆、DNA测序或者免疫印迹等检测之前,进行分子的纯化。(维基)
电泳的定义:施加电场后,离子和带电大分子在基质中的运动。
琼脂糖和聚丙烯酰胺是蛋白核酸等大分子电泳基质。大分子因为大小、电荷和结构的不同在电泳基质中分离。
蛋白分离基础:大小、结构、电荷。
核酸分离基础:主要是大小。碱基组成和序列对电泳速度影响较小。
在分离蛋白质和在分离小核酸时凝胶通常由不同浓度的丙烯酰胺和交联剂聚合而成;分离大一点的核酸时(长度超过几百个碱基),纯化的琼脂更适合作为基质。
大分子电泳电学基础:
欧姆定律:V=IR
W=IV
电泳期间,其中一个参数固定,其余两个随着电泳系统电阻的变化而改变。
垂直系统中,导电离子如氯离子电泳出胶后,凝胶电阻会增加。
水平系统中,电阻变化很小。不过,高压和增加跑胶长度能降低电阻。
固定不同参数各有优缺点。
测序凝胶一般固定功率,以保持温度的一致。
用于蛋白质和DNA分离的琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶一般固定电压或电流。
Reference
1. Rickwood, D. and Hames, B.D., Gel Electrophoresis of Nucleic Acids: A Practical Approach, IRL Press Limited, 1982.
上海红荣微再公司在中国代理销售的LONZA琼脂糖系列产品是由位于美国Rockland的子公司生产,该子公司主要研发生产:分子生物学和基于细胞检测的生物技术类产品。分子生物学产品主要包括DNA/RNA分离、蛋白分离的等电聚焦凝胶电泳类产品;细胞检测类的产品有体外毒理检测、药物筛选研究、细胞健康检测;LONZA琼脂糖粉已经成为世界上zui大的琼脂糖粉生产供应商,产品不仅仅应用在*范围内的学术研究、政府公共研究、生物技术公司、生物制药公司,更重要的是现在已经成功进入个人护理、化妆品和医疗等广泛的应用领域,被誉为世界上技术zui高、质量的琼脂糖产品。
LONZA琼脂糖粉产品系列
在等电聚焦凝胶电泳类产品中,LONZA琼脂糖粉分为:低熔点琼脂糖粉(Low Melting Agarose)、高分辨率琼脂糖粉(High Sieving Agarose)、标准熔点琼脂糖粉(Standard Melting Agarose)和其它应用琼脂糖粉。下面为LONZA琼脂糖粉详细介绍:
分子生物学级别的琼脂糖粉:SeaKem LE,SeaPlaque和NuSieve 3:1。
遗传学技术级别的琼脂糖粉:SeaKem GTG,SeaPlaque GTG,NuSieve GTG,Seakem Gold和Incert。
LONZA琼脂糖粉的分类:
①标准熔点琼脂糖粉
SeaKem LE琼脂糖粉:
属分子生物学级别,是进行核酸电泳和印迹分析的理想凝胶。每块凝胶均能提供清晰的DNA条带及一致的分辨能力。不含可检测到的DNase和RNase活性,具有高强度、低背景等优点。因其电渗(EEO)较低,故DNA在凝胶中的迁移速度较快。同时可在Ouchterlony和放射免疫扩散(RID)实验中进行蛋白凝胶电泳。(为保证对DNA修饰酶产生zui小的抑制作用,特推荐使用SeaKem GTG琼脂糖,因为这种遗传学技术级别的琼脂糖能与限制性消化,DNA连接和克隆等操作中所使用的酶高度兼容。)
SeaKem LE琼脂糖粉的应用:DNA和RNA的电泳和印迹、免疫沉淀。
厂家品牌 货号 产品名称 包装规格
LONZA 50001 Seakem LE Agarose琼脂糖粉 25g
LONZA 50000 Seakem LE Agarose琼脂糖粉 125g
LONZA 50004 Seakem LE Agarose琼脂糖粉 500g
SeaKem GTG琼脂糖粉
属遗传学技术级别,是标准胶凝温度,高凝胶强度的琼脂糖。可分辨大于1000bp的DNA fragment。主要用于DNA电泳从“SeaKem GTG琼脂糖”凝胶中回收的DNA可放心的用于限制性消化和连接反应。
SeaKem GTG琼脂糖粉的应用:DNA和RNA回收、DNA和RNA的电泳及印迹。
厂家品牌 货号 产品名称 包装规格
LONZA 50071 Seakem GTG Agarose琼脂糖粉 25g
LONZA 50070 Seakem GTG Agarose琼脂糖粉 125g
LONZA 50074 Seakem GTG Agarose琼脂糖粉 500g
NuSieve 3:1琼脂糖粉
属分子生物学级别,标准熔点,用于制备适于鉴定小片段DNA,RNA和≦1kb的PCR产物的高强度凝胶。主要用于分析电泳,以提高跑胶和印迹的速度。其性能检测确保10bp-1500bp范围的DNA fragment均能获得良好的分辨效果。(如果您需要使用低熔点琼脂糖,特推荐NuSieve GTG琼脂糖 产品,研究证实其适用于那些需要与克隆实验中所使用的酶*兼容的应用。)
NuSieve 3:1琼脂糖粉的应用:小片段DNA和RNA分析,小片段DNA和RNA的Southern blotting和Northern blotting。
厂家品牌 货号 产品名称 包装规格
LONZA 50091 NuSieve 3:1 Agarose琼脂糖粉 25g
LONZA 50090 NuSieve 3:1 Agarose琼脂糖粉 125g
LONZA 50094 NuSieve 3:1 Agarose琼脂糖粉 500g
②低熔点琼脂糖粉
SeaPlaque琼脂糖粉:
属分子生物学级别,是一种低熔点琼脂糖,所制凝胶具有更高的筛过特性,更透明。是理想的DNA和RNA电泳产品,也适合组织培养细胞的克隆和病毒空斑分析。
为保证在凝胶中进行的DNA酶反应不受影响,特推荐使用SeaPlaque GTG琼脂糖,这种琼脂糖已被证明其对一些常规性的用于胶内操作(如限制型消化,克隆)的酶显示出zui小的抑制作用。DNase和RNase活性未检测到。
SeaPlaque琼脂糖粉的应用:DNA和RNA电泳、病毒空斑检测、细胞培养细胞的克隆。
厂家品牌 货号 产品名称 包装规格
LONZA 50101 SeaPlaque AGAROSE琼脂糖粉 25G
LONZA 50100 SeaPlaque AGAROSE琼脂糖粉 125G
SeaPlaque GTG琼脂糖粉
属遗传学技术级别,用于分离大于1000bp的DNA和PCR产物片段。这种低熔点琼脂糖zui适于直接对重熔琼脂糖中的核酸进行酶学操作,而无需额外的DNA纯化步骤;也适合在重熔琼脂糖凝胶中进行PCR及测序反应。
SeaPlaque GTG琼脂糖粉的应用:大片段DNA的分析和回收、凝胶内PCR反应(In-gelPCR)、凝胶内(In-gel)连接和转化实验、DNA和RNA的消化。
厂家品牌 货号 产品名称 包装规格
LONZA 50111 SeaPlaque GTG AGAROSE琼脂糖粉 25G
LONZA 50110 SeaPlaque GTG AGAROSE琼脂糖粉 125G
SeaPrep琼脂糖粉
是一种*的“软琼脂糖”,具有超低的胶凝及熔化温度。用于杂交瘤克隆及制造软的,高纯度凝胶。它以一种严格的具有代表性的模式扩增cDNA文库,减少在扩增的过程中由于不同复制率所引起的低丰度克隆丢失的可能性。
SeaPrep琼脂糖粉的应用:细胞培养、杂交瘤克隆、封装/包埋细胞。
厂家品牌 货号 产品名称 包装规格
LONZA 50302 SeaPrep Agarose琼脂糖粉 25g
NuSieve GTG琼脂糖粉
属遗传学技术级别,低熔点,能有效的分辨10bp-1000bp的DNA fragment, PCR和RT-PCR产物;使用该琼脂糖制备凝胶不仅易于操作并且可保证不同批次产品间一致的电泳迁移速度,可直接在重熔NuSieve GTG琼脂糖中进行克隆操作,无需DNA的抽提步骤。这种琼脂糖也适用于各种需在重熔琼脂糖凝胶中进行的反应。该产品经检测并证实能够支持在重熔琼脂糖凝胶中直接进行DNA连接和转化。
NuSieve GTG琼脂糖粉的应用:小片段DNA的分析和回收、凝胶内PCR反应(In-gelPCR)凝胶内(In-gel)连接和转化实验。
厂家品牌 货号 产品名称 包装规格
LONZA 50081 NuSieve GTG Agarose琼脂糖粉 25g
LONZA 50080 NuSieve GTG Agarose琼脂糖粉 125g
LONZA 50084 NuSieve GTG Agarose琼脂糖粉 500g
③高分辨率琼脂糖粉
MetaPhor琼脂糖粉
是一种中熔点琼脂糖,提供两倍于的筛过琼脂糖产品的分辨能力。MetaPhor琼脂糖可用于水平凝胶电泳分辨20bp-800bp的DNA fragment,PCR和RT-PCR产物,分辨能力约为DNA fragment大小的2%。MetaPhor琼脂糖凝胶(2%-4%)与聚丙烯酰胺凝胶(4%-8%)的分辨率接近。这些凝胶zui适于分辨AMPFLPs,STRs,三核苷酸和四核苷酸重复序列。
MetaPhor琼脂糖粉的应用:小片段PCR产物分析、STR分析、RT-PCR。
厂家品牌 货号 产品名称 包装规格
LONZA 50181 MetaPhor Agarose琼脂糖粉 25g
LONZA 50180 MetaPhor Agarose琼脂糖粉 125g
LONZA 50184 MetaPhor Agarose琼脂糖粉 500g
NuSieve 3:1琼脂糖粉
属分子生物学级别,标准熔点,用于制备适于鉴定小片段DNA,RNA和≦1kb的PCR产物的高强度凝胶。主要用于分析电泳,以提高跑胶和印迹的速度。其性能检测确保10bp-1500bp范围的DNA fragment均能获得良好的分辨效果。(如果您需要使用低熔点琼脂糖,特推荐NuSieve GTG琼脂糖 产品,研究证实其适用于那些需要与克隆实验中所使用的酶*兼容的应用。)
NuSieve 3:1琼脂糖粉的应用:小片段DNA和RNA分析、RT-PCR,小片段DNA和RNA的Southern blotting和Northern blotting。
厂家品牌 货号 产品名称 包装规格
LONZA 50091 NuSieve 3:1 Agarose琼脂糖粉 25g
LONZA 50090 NuSieve 3:1 Agarose琼脂糖粉 125g
LONZA 50094 NuSieve 3:1 Agarose琼脂糖粉 500g
④Identity琼脂糖粉
I.D.NA琼脂糖粉
是一种高强度的低渗琼脂糖,用于在DNA鉴定测试中保证DNA分辨能力的一致性。经证实,在DNA鉴定实验条件下可获得区分VNTRs,HVRs,RFLPs及DNA大小标准物所需的清晰明亮的DNA条带。这种琼脂糖显示出较高的印迹DNA转移效率和DNA图谱分析所需的不同批号产品的一致性。
I.D.NA琼脂糖粉的应用:DNA鉴定测试。
厂家品牌 货号 产品名称 包装规格
LONZA 50121 InCert Agarose琼脂糖粉 1g
LONZA 50123 InCert Agarose琼脂糖粉 5g
⑤高纯度琼脂糖粉
IsoGel琼脂糖粉
于等电聚焦电泳(IEF),减少静息的阳离子及运动阳离子的制造程序使之具有检测不到的EEO。除了能灌制垂直及水平的薄胶外,还具有足够的强度用于在垂直管内制胶。
IsoGel琼脂糖粉的应用:等电聚焦电泳。
厂家品牌 货号 产品名称 包装规格
LONZA 50202 Iso Gel Agarose琼脂糖粉 25g
大量现货
LONZA SeaKem® Gold Agarose金琼脂糖粉,超长DNA凝胶电泳
产品英文名 SeaKem® Gold Agarose
产品中文名 SeaKem®金琼脂糖粉
适用:长片段及超长片段DNA跑胶
SeaKem® Gold Agarose是一种高凝胶强度,低EEO(电渗),标准凝胶温度的琼脂糖。这种遗传学技术级别(Genetic Technology Grade™ Agarose)的琼脂糖zui适于在脉冲场凝胶电泳法(pulsed field gel electrophoresis-PFGE)实验中快速分辨巨大碱基对DNA:长片段及超长片段DNA。由于SeaKem®Gold Agarose金胶琼脂糖的低EEO特性,在SeaKem®Gold琼脂糖凝胶电泳实验中,DNA电泳迁移率远远超过传统的琼脂糖凝胶电泳。PFGE的跑胶时间依使用的缓冲液和琼脂糖浓度的不同可减少至原电泳时间的50%。因其高凝胶强度,即使是使用低浓度(0.5%的SeaKem Gold琼脂糖凝胶),操作处理依然很方便,从而允许在常规电泳中分离更大的DNA fragment并减少PFGE中的DNA分离的耗时。为了更好的在PFGE电泳后对大片段DNA fragment回收,推荐使用 SeaPlaque™ GTG™ Agarose和ß-Agarase。
品牌 | 货号 | 产品描述 | 包装 | 目录价 |
LONZA | 50152 | SeaKem® Gold Agarose 金琼脂糖粉 25g | 25g/瓶 | 3220元 |
LONZA | 50150 | SeaKem® Gold Agarose 金琼脂糖粉125g | 125g/瓶 | 11870元 |
更多琼脂及电泳基质产品信息华雅再生医学旗舰公司:红荣微再(上海)生物工程技术有限公司 :1500 1904 520。红荣微再-客服: 2395557778 经销商专员。红荣微再以“传递科学价值,服务科学研究”为宗旨,主营干细胞、医疗、细胞治疗、器官再生四大板块的产品。