人间充质干细胞的不同来源

人类骨髓来源间充质干细胞

新生儿脐带来源间充质干细胞

新生儿脐带血来源间充质干细胞

人类脐带华通氏胶来源间充质干细胞

人类脂肪来源间充质干细胞

人类羊水来源间充质干细胞

人类牙髓来源间充质干细胞

人类皮肤来源间充质干细胞

新生儿胎盘来源间充质干细胞

人类唾液腺来源间充质干细胞

人类滑膜来源间充质干细胞

1 人类骨髓来源间充质干细胞

密度梯度离心骨髓，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类骨髓来源间充质干细胞分离

Ficoll密度梯度离心

人类骨髓来源间充质干细胞原代及传代培养

Knock out DMEM，DMEM+10%FBS

2 新生儿脐带来源间充质干细胞 新生儿脐带血来源间充质干细胞

组织块培养法、密度梯度离心法等处理脐带、脐带血，贴壁法原代培养间充质干细胞。

新生儿脐带来源间充质干细胞 新生儿脐带血来源间充质干细胞分离

Ficoll-Hypaque 密度梯度离心，酶消化法（0.25% 胰蛋白酶-EDTA），组织块培养法

新生儿脐带来源间充质干细胞 新生儿脐带血来源间充质干细胞原代及传代培养

DMEM+10%FBS，10%FCS，MSCGM+10%FCS

3人类脐带华通氏胶来源间充质干细胞

组织块培养法、酶消化法处理华通氏胶，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类脐带华通氏胶来源间充质干细胞分离

组织块培养法, 酶消化法 (0.1% 胶原酶II,1 mg/ml 胶原酶B+胰蛋白酶, 胶原酶 +hyaluronidase +胰蛋白酶,胰蛋白酶-EDTA, 0.26% 胶原酶I+ 0.07% hyaluronidase+0.125% 胰蛋白酶)

人类脐带华通氏胶来源间充质干细胞原代及传代培养

DMEM/DMEM-F12 + 10% FBS

4 人类脂肪来源间充质干细胞

酶消化法处理脂肪组织，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类脂肪来源间充质干细胞分离

酶消化法(1.5 mg/ml 胶原酶 I, 1 mg/ml 胶原酶-I in 0.1% BSA)

人类脂肪来源间充质干细胞原代及传代培养

DMEM-Low Glucose+MCDB201+ 2% FCS,DMEM+ 20% FBS,MesenproRS

5 人类羊水来源间充质干细胞

密度梯度离心、酶消化法处理羊水，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类羊水来源间充质干细胞分离

密度梯度离心,酶消化法 (0.25% 胰蛋白酶 +1.2 units/ml of dispase + 2 mg/ml 胶原酶I）

人类羊水来源间充质干细胞原代及传代培养

a-MEM + 20% FBS, DMEMF12 + 10% FBS, high glucose DMEM + 20% hESC-defined FBS, KSR-based 培养基

6 人类牙髓来源间充质干细胞

酶消化法处理牙髓，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类牙髓来源间充质干细胞分离

酶法 (387.1 U/+mg 胶原酶+ 0.70 U/mg dispase II)

人类牙髓来源间充质干细胞原代及传代培养

D-MEM-F12, a-MEM + 2% FCS

7 人类皮肤来源间充质干细胞

酶消化法处理皮肤组织，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类皮肤来源间充质干细胞分离

酶消化法 (0.6 U/ml dispase, 0.62 Wunsch U/ml Liberase Blendzyme 1,1.25 mg/ml 胶原酶 I)

人类皮肤来源间充质干细胞原代及传代培养

DMEM-F12 1 10/5/0.5% FBS, DMEM + 20% FBS

8 新生儿胎盘来源间充质干细胞

Ficoll 密度梯度离心、酶消化法处理胎盘，贴壁法原代培养间充质干细胞。

新生儿胎盘来源间充质干细胞分离

Ficoll 密度梯度离心, 酶消化法(1 mg/ml Dispase, 300 U/ml 胶原酶, 100 U/ml Hyalluronidase,

80 U/ml DNAse I, 0.25% 胰蛋白酶-EDTA)

新生儿胎盘来源间充质干细胞原代及传代培养

DMEM 低糖 + 20% FBS

9 人类唾液腺来源间充质干细胞

酶消化法处理唾液腺，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类唾液腺来源间充质干细胞分离

酶消化 (1.67 mg/ml 胶原酶+ 1.33 mg/ml hyaluronidase, 1.67 mg/ml dispase; 5.01 mg/ml 胶原酶2 + 3.99 mg/ml hyaluronidase,33.4 mg/ml dispase)

人类唾液腺来源间充质干细胞原代及传代培养

DMEM + 10% FCS, DMEMF12 + 3% FBS

10 人类滑膜来源间充质干细胞

Ficoll–Paque 密度梯度离心、酶消化法处理滑膜，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类滑膜来源间充质干细胞分离

Ficoll–Paque 密度梯度离心, 酶消化法 (3mg/ml 胶原酶V)

人类滑膜来源间充质干细胞原代及传代培养

a-MEM + 10% FBS, 20% FBS

名词解释

Ficoll密度梯度离心 常用来分离人外周血单个核细胞（PBMC）的分层液比重是 1.077±0.001 的聚蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F／H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体，呈中性，平均分子量为400,000，当密度为1.2g／ml仍未超出正常生理性渗透压,也不穿过生物膜。红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重，离心后漂浮于分层液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞，就可从外周血中分离到单个核细胞。Ficoll-Paque 分离液适用血液、骨髓和脐带血来源的人单个核细胞分离（包括间充质干细胞）。

DMEM Dulbecco's Modified Eagle Medium是一种广泛使用的基础培养基，可用于支持很多种类的哺乳动物细胞生长。

组织块培养法 组织切成小块，接种培养器皿培养细胞。

酶消化法 用胰蛋白酶和胶原酶等消化组织块，分离细胞进行培养。

胶原酶 是一种蛋白酶，它能够特异性的结合 Pro-X-Glyc-Pro序列中，中性氨基酸（X）和甘氨酸之间的肽键。该序列高频率的存在于胶原中。胶原酶是*的一种可以降解广泛存在于结缔组织中的具有三股螺旋的天然胶原纤维的蛋白酶。

Hyaluronidase 透明质酸酶

Dispase 分散酶

DNAse 脱氧核糖核酸酶

附：人间充质干细胞的培养

人间充质干细胞的下游应用是组织修复等疾病治疗，因此它的培养要满足医用的高标准。随着临床应用的成熟，间充质干细胞培养基也经历了从有血清到无血清培养基的转变。

有血清培养基一开始使用的是胎牛血清，胎牛血清是天然产品，批次间差异大，影响实验稳定性，尤其还是异源物，会有病原体污染风险和免疫影响，不利治疗安全，需要额外监管。于是越来越多的血清培养基选择了自体或同源异体的人源血清作为培养基添加物，包括人血清、血小板裂解液和脐带血清。

低血清或人源血清仍然不够稳定，也不能*免除病原体的污染风险，随之兴起的是成分确定的无血清培养基。无血清培养基用重组人蛋白代替血清中的天然蛋白，以此来消灭异种蛋白输入人体可能会引起的免疫抗体反应。比如血清中zui基础的白蛋白、转铁蛋白和胰岛素，无血清培养基都改用重组人转铁蛋白和重组人胰岛素代替，而不是提取天然产物。无血清培养基发展中，确定了多种生长因子是人间充质干细胞扩增必须添加的。

相关产品

Ficoll 密度梯度分离液 Ficoll-Paque PREMIUM改良于Ficoll-Paque PLUS，后者作为一种从骨髓、外周血和脐带血中高得率分离单个核细胞的无菌密度梯度介质已应用了三十多年。与Ficoll-Paque PLUS不同的是，Ficoll-Paque PREMIUM的生产是在严格控制环境下完成的, 生产条件符合ISO 13485:2003标准，GMP认证和美国药典的建议，可用于生产细胞治疗相关产品。细胞毒性等级为0。有RSF文件。

胶原酶 I 型胶原酶从溶组织梭菌制备，用于细胞和组织的解离。

人间充质干细胞无血清培养基 与以DMEM为基础的血清培养基相比优势在于，成分确定，无动物源成分，适合临床研究。HY StemCell CCGmHum^TM 人间充质干细胞无血清培养基是成分确定、无血清、无动物源，无需铺板胶的*培养基。适用脐带或脂肪来源的人间充质干细胞的原代培养。培养的hMSC可传多代。HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人间充质干细胞无血清培养基包括【Basal Medium 基础培养基】 和 【Supplement Medium 细胞因子添加物】两部分。基础培养基中添加Hepes和L-谷氨酰胺。细胞因子添加物中含有多种细胞生长因子、粘附蛋白、转铁蛋白、胰岛素、微量元素和人白蛋白等成分。

产品信息

密度梯度分离液 胶原酶

人间充质干细胞无血清培养基

人间充质干细胞的鉴定参见人间充质干细胞流式检测方案

参考文献

1 Dolly Mushahary, et al. Isolation, C*tion, and Characterization of Human Mesenchymal Stem Cells.2017

2 人类间充质干细胞库建设与管理规范，SZDB/Z 126-2015

更多间充质干细胞培养产品华雅再生医学旗舰公司：红荣微再（上海）生物工程技术有限公司，红荣微再（上海）生物工程技术有限公司以“传递科学价值，服务科学研究”为宗旨，主营干细胞、医疗、细胞治疗、器官再生四大板块的产品。