人间充质干细胞培养基已经发展到了第三代

*代 培养基+牛血清

第二代 培养基+牛血清替代品：人血清、血小板裂解液和脐带血清

第三代 无血清、无动物源、成分确定的培养基

第三代人间充质干细胞培养基不含牛血清或人血清之类的血清替代品，无动物源而且成分确定，免除了异种血清带来的病原体污染风险，批次稳定，适合干细胞治疗的临床研究。

HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人间充质干细胞无血清培养基

中文名：HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人间充质干细胞无血清培养基

英文名：HY STEMCELL CCGmHuM^TM  Human MSCs Growth Medium

HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人间充质干细胞无血清培养基是成分确定、无血清、无异源物，无需铺板胶的*培养基。适用脐带或脂肪来源的人间充质干细胞的原代培养扩增。培养的hMSC可传多代。

特点

Serum-free 无血清成分

Xeno-free 无异种蛋白

Chemically-defined 化学成分明确

NO plate coating necessary 无须昂贵的铺板蛋白

Perform better than FBS medium 生长分化优于血清培养基

组份

HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人间充质干细胞无血清培养基包括【Basal Medium 基础培养基】 和 【Supplement Medium 细胞因子添加物】两部分。基础培养基中添加HEPES和L-谷氨酰胺。细胞因子添加物中含有多种细胞生长因子、粘附蛋白、转铁蛋白、胰岛素、微量元素和人白蛋白等成分。

培养表现

使用HY StemCell CCGmHuM^TM 人间充质干细胞无血清培养基培养人脐带间充质干细胞，传到第7代，MSC形态功能维持良好。

应用

适用于原代培养脐带或脂肪组织来源的人间充质干细胞。

培养条件

培养基：*培养基

细胞系：脐带或脂肪组织来源的人间充质干细胞

细胞类型：贴壁

储存

基础培养基保存在2～8℃。细胞因子添加物保存在–20°C。

使用注意

为保障活性，建议把【Supplement Medium 细胞因子添加物】一次解冻后分装再冻存，不宜反复冻融。

订购信息

欢迎您致电 华雅再生医学旗舰公司：红荣微再（上海）生物工程技术有限公司  ：152 1681 4001。红荣微再-客服: 316 808 6348  经销商专员

背景知识

一 人间充质干细胞培养基的发展

人间充质干细胞的来源

从1970年发现以来，脂肪组织、胎盘、牙髓、滑膜、外周血、牙周韧带、子宫内膜、脐带和脐带血中都有研究发现间充质干细胞[1]，不过应用比较多的来源还是骨髓、脂肪和脐带组织中的间充质干细胞[2]。目前，异体间充质干细胞密度zui高来源是脐带，每毫升zui高能获得470万个MSC，而自体间充质干细胞密度zui高来源是脂肪组织，每毫升zui高能获得155万个MSC[3]。HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人间充质干细胞无血清培养基就是适用脐带和脂肪组织来源的hMSC培养。

人间充质干细胞的培养发展[4]

人间充质干细胞的下游应用是组织修复等疾病治疗，因此它的培养要满足医用的高标准。随着临床应用的成熟，间充质干细胞培养基也经历了从有血清到无血清培养基的转变。

有血清培养基一开始使用的是胎牛血清，胎牛血清是天然产品，批次间差异大，影响实验稳定性，尤其还是异源物，会有病原体污染风险和免疫影响，不利治疗安全，需要额外监管。于是越来越多的血清培养基选择了自体或同源异体的人源血清作为培养基添加物，包括人血清、血小板裂解液和脐带血清。

低血清或人源血清仍然不够稳定，也不能*免除病原体的污染风险，随之兴起的是成分确定的无血清培养基。无血清培养基用重组人蛋白代替血清中的天然蛋白，以此来消灭异种蛋白输入人体可能会引起的免疫抗体反应。比如血清中zui基础的白蛋白、转铁蛋白和胰岛素，无血清培养基都改用重组人转铁蛋白和重组人胰岛素代替，而不是提取天然产物。无血清培养基发展中，确定了多种生长因子是人间充质干细胞扩增必须添加的。HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人间充质干细胞无血清培养基细胞因子添加物中含有多种细胞生长因子、粘附蛋白、转铁蛋白、胰岛素、微量元素和人白蛋白等成分。

二 人类间充质干细胞的分离与原代培养方法[5]

新生儿脐带间充质干细胞分离与原代培养

新生儿脐带组织剥取华通氏胶，以组织块培养法或酶消化法分离新生儿间充质干细胞，

贴壁法做原代培养。

新生儿脐带血来源间充质干细胞分离与原代培养

新生儿脐带血样本，与磷酸缓冲液 1:1 稀释后，以密度梯度离心法分离单个核细胞，贴

壁法培养。定期更换培养基直到贴壁生长的成纤维细胞样的细胞达到汇合。

新生儿胎盘间充质干细胞分离与原代培养

剥取胎盘羊膜、绒毛膜或绒毛组织，以酶消化法分离胎盘间充质干细胞，贴壁法做原代

培养。

人类脂肪间充质干细胞分离与原代培养

成人脂肪组织，以酶消化法分离脂肪间充质干细胞，贴壁法做原代培养。

人类牙髓间充质干细胞分离与原代培养

牙齿样本，完整剥离牙髓，以酶消化法分离牙髓间充质干细胞，贴壁法做原代培养。

人类骨髓间充质干细胞分离与原代培养

人骨髓液样本，以密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞，贴壁法作原代培养。

人类宫内膜间充质干细胞分离与原代培养

宫内膜组织样本以酶消化法分离子宫内膜干细胞，并做原代培养。或

人羊水来源间充质干细胞分离与原代培养

人羊水样本，100 目滤器过滤后离心，弃上清。以培养液重悬细胞沉淀，贴壁法培养。

定期更换培养基直到贴壁生长的成纤维细胞样的细胞达到汇合。

人类母乳来源间充质干细胞分离与原代培养

人类母乳样本，100 目滤器过滤后离心，弃上清。以培养液重悬细胞沉淀，贴壁法培养。

定期更换培养基直到贴壁生长的成纤维细胞样的细胞达到汇合。

人类滑膜来源间充质干细胞分离与原代培养

人类滑膜组织样本，以酶消化法分离滑膜间充质干细胞。离心洗涤后，贴壁法培养。定

期更换培养基直到贴壁生长的成纤维细胞样的细胞达到汇合。

三 人脐带间充质干细胞[6]

图源网络：脐带和华通氏胶

人脐带内、脐血管周围含有丰富的基质即华通胶，胶内含有大量间充质干细胞——人脐带华通胶间充质干细胞（human umbilical cord Wharton′s jellyderived mesenchymal stem cells，hWJ-MSC），该干细 胞能够稳定表达间充质干细胞*的分子标记物。 近几年，hWJ-MSC 已成为干细胞治疗领域理想的种 子细胞。其高表达 CＤ54、CＤ146 等生长因子，提示其具有高度增殖分化潜能，同时 hWJ-MSC 通过分泌相关因子或者通过细胞与细胞间直接接触调节单核 细胞、巨噬细胞等免疫细胞的免疫功能。基于 hWJMSC 取材方便、来源广泛、增殖分化潜能高、免疫原性低等特点，hWJ-MSC 的相关研究已经从zui初的体 外细胞实验发展到体内动物实验，更有学者已经将 hWJ-MSC 应用到了临床实验中。

参考文献

1 FENG-JUAN LV et al.Concise Review: The Surface Markers and Identity of Human Mesenchymal Stem Cells.2014.

2 Marcin Majka et al.Concise Review: Mesenchymal Stem Cells in Cardiovascular Regeneration: Emerging Research Directions and Clinical Applications.2017.

3 C. ThomasVangsness Jr. et al.Umbilical Cord Tissue Offers the Greatest Number of Harvestable Mesenchymal Stem Cells for Research and Clinical Application: A Literature Review of Different Harvest Sites.2015.

4 Dolly Mushahary et al.Isolation, C*tion, and Characterization of Human Mesenchymal Stem Cells.2017.

5 SZDB/Z 126 2015《人类间充质干细胞库建设与管理规范》

6 何蓓 等.人脐带华通胶间充质干细胞的生物学特性及研究新进展.2016.

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