StemCell：CAR-T免疫细胞疗法-T细胞负选产品
CAR-T免疫细胞疗法-人T细胞和亚群的负选（Human T Cell and Subset Isolation by negative Selection）
细胞类型 | 货号 | 产品名称 | 纯度 | 适用的染色抗体 |
初始Pan-T 细胞 | 17961 17961RF | EasySep Human Naïve PanT Cell Isolation Kit EasySep™人初始Pan-T细胞分选试剂盒 | 96.1±2.3% | CD3（货号 #60011） CD4（货号 #60016） CD8a（货号 #60022） CD45RO（货号 #60097） |
T细胞 | 17951 17951RF | EasySep Human T Cell Isolation Kit EasySep™人T细胞分选试剂盒 | 96.7 ± 1.5% | CD2（货号#60007） CD3（货号#60011） CD4（货号#60016） CD8a（货号#60022） CD45（货号#60018） |
19051 19051RF | EasySep Human T Cell Enrichment Kit EasySep™人T细胞富集试剂盒 | 95.0 - 99.0% |
CAR-T免疫细胞疗法-人CD4+T细胞及亚群的负选（Human CD4+T Cell and Subset Isolation by negative Selection）
细胞类型 | 货号 | 产品名称 | 纯度 | 适用的染色抗体 |
CD4+T细胞 | 17952 17952RF | EasySep Human CD4+ T Cell Isolation Kit EasySep™人CD4+T细胞分选试剂盒 | 94.8 ± 2.3% | CD3（货号 #60011） CD4（货号 #60016） CD8a（货号 #60022） CD45（货号 #60018） |
19052 19052RF | EasySep Human CD4+ T Cell Enrichment Kit EasySep™人CD4+T细胞富集试剂盒 | 92.0 - 97.0% | ||
静息CD4+ T细胞 | 17962 17962RF | EasySep™人静息CD4+ T 细胞分选试剂盒 | 89.0 ± 5.3% | CD3（货号 #60011） CD8（货号 #60022） CD25（货号 #60153） |
初始CD4+ T细胞 | 17555 17555RF | EasySep™人初始CD4+ T细胞分 选试剂盒II | 96.6 ± 1.5% | CD3（货号 #60011） CD4（货号 #60016） CD45（货号 #600） CD45R（货号 #60097） |
19555 19555RF | EasySep™人初始CD4+ T细 胞分选试剂盒 | 91.3 - 96.9% | ||
19155 19155RF | EasySep™人初始CD4+ T细 胞富集试剂盒 | 91.0 - 95.0% | ||
记忆CD4+ T细胞 | 19157 19157RF | EasySep™人记忆CD4+ T 细胞富集试剂盒 | 86.0 - 98.0% |
CAR-T免疫细胞疗法-人CD8+ T细胞及亚群的负选（Human CD8+ T Cell and Subset Isolation by Negative Selection）
细胞类型 | 货号 | 产品名称 | 纯度 | 适用的染色抗体 |
CD8+ T细胞 | 17953 17953RF | EasySep™人CD8+ T细胞分选试剂盒 | 85.6 ± 4.9% | CD3（货号 #60011） CD4（货号 #60016） CD8a（货号 #60022） CD45（货号 #60018） |
19053 19053RF | EasySep™人CD8+ T细胞富集试剂盒 | 84.0 -95.0% | ||
初始CD8+ T细胞 | 19258 19258RF | EasySep™人初始CD8+ T细胞分选试剂盒 | 92.3 ± 4.0% | CD3（货号 #60011） CD8a（货号 #60022） CD45（货号 #60018） CD45R（货号 #60097） CD56（货号 #60021） |
19158 19158RF | EasySep™人初始CD8+ T细胞富集试剂盒 | 85.0 - 92.0% | ||
记忆CD8+ T细胞 | 19159 19159RF | EasySep™人记忆CD8+ T细胞富集试剂盒 | 72.0 - 92.0% | CD3（货号 #60011） CD8a（货号 #60022） CD45（货号 #60018） CD45R（货号 #60097） |
以上产品适用处理PBMC ，1 x 109个细胞。
文献版CAR-T免疫细胞疗法-细胞分选产品
文献 | 疾病 | 靶点 | CAR-T细胞工程 | 细胞分选产品 | 货号 |
1 | 常见肝癌HCC（hepatocellular carcinoma ） | HCC特异性分泌蛋白抗原（alpha-fetoprotein ，AFP） | —— | EasySep™ Human T Cell Isolation Kit | 17951 17951RF |
2 | 多种肿瘤：carcinomas, neuroblastomas and leukemias等 | 多种肿瘤 | 表达自然杀伤细胞受体1（NCR1 ，natural cytotoxic receptor 1） | EasySep™ Human T Cell Isolation Kit
| 17951 17951RF |
3 | —— | 抗原A激发CAR的表达，抗原B激活CAR T细胞 | 双受体系统，组合 | RosetteSep™ Human CD4+ T Cell Enrichment Cocktail and RosetteSep™ Human CD8+ T Cell Enrichment Cocktail | 15022，15062和 |
4 | 实体瘤 | —— | CD4+T细胞激发系统免疫 | EasySep™ Mouse T Cell Isolation Kit | 19851 19851RF |
1.Liu H et al. (2017) Targeting alpha-fetoprotein(AFP)-MHC complex with CAR T-cell therapy for liver cancer. Clin Cancer Res 23(2): 478-88.
2.Tal Y et al. (2014) An NCR1-based chimeric receptor endows T-cells with multiple anti-tumor specificities. Oncotarget 5(21): 10949-58.
3.Roybal KT et al. (2016). Precision tumor recognition by T cells with combinatorial antigen-sensing circuits. Cell 164(4): 770-9.
4.Spitzer MH et al. (2017). Systemic immunity is required for effective cancer immunotherapy. Cell 168(3): 487-502.
说明
1.RF：货号后加RF，比如17951RF，代表RoboSep™试剂盒：包含EasySep™分选试剂盒、RoboSep™缓冲液和1-2盒RoboSep™枪头。
2.分选试剂盒和富集试剂盒的主要区别：分选试剂盒是富集试剂盒的更新版，实验耗时更少。
CAR-T免疫细胞疗法配套产品
品牌 | 货号 | 产品描述 |
StemCell | 18000 | EasySep Violet Magnet无柱免疫磁珠分选磁极 |
StemCell | 10981 | ImmunoCult™-XF T Cell Expansion Medium 无血清T细胞扩增培养基 |
StemCell | 20144 | EasySep™ Buffer |
TAKARA | T100B | RetroNectin®Recombinant Human Fibronectin Fragment 重组人纤粘连蛋白，和激发型CD3单抗共同刺激T细胞增殖 |
TAKARA | T100A |
CAR-T免疫细胞疗法产品：CD3-CD28激发型单抗用于CAR-T细胞培养
品牌 | 货号 | 产品描述 |
Gibco | 11131D 11132D 11161D | Dynabeads® Human T-Activator CD3/CD28 |
PeproTech/BioGems | 05121-25-500 | Anti-Human CD3 mAb （克隆号OKT3） |
PeproTech/BioGems | 10311-25-500 | Anti-Human CD28 mAb（克隆号CD28.2） |
StemCell | 10971 | ImmunoCult™Human CD3/CD28 T Cell Activator |
StemCell | 10970 | ImmunoCul™Human CD3/CD28/CD2 T Cell Activator |
CAR-T免疫细胞疗法—背景
十月底，诺华的CTL019之后，FDA公布Kite公司的Yescarta CAR-T免疫细胞疗法成为FDA认证的第二个基因疗法。自从Emily Whitehead带来癌症治愈新希望后，CAR-T免疫细胞疗法再次稳固了它免疫细胞疗法领域的中心地位。
CAR-T免疫细胞疗法流程
1、从癌症病人身上获取T细胞。
2、利用基因工程技术给T细胞加入嵌合抗体。
3、体外培养，大量扩增CAR-T细胞。
4、扩增好的CAR-T细胞输回病人体内。
CAR-T免疫细胞疗法的T细胞来自外周血（PBMC）。临床研究表明，T细胞进行亚群分选后的CAR-T疗效更好。诺华和Kite的 CAR-T 产品使用的都是固定比例的 CD4+/CD8+T 细胞4。
CAR-T免疫细胞疗法—T细胞分选
用于CAR-T基因改造的人外周血T细胞的选择依据1,2：
1.初始细胞比效应细胞好。
Nature 3月的CAR-T综述总结了选择合适的人外周血T细胞亚群有利于临床治疗。
图a：T细胞亚群的分化：TN到TCM细胞仍保有自我更新能力。选择分化程度较低的初始T细胞（TN），记忆T细胞（TSCM或TCM）而不是分化末端的效应T细胞用于基因改造可能会带来更大治疗效应。
2.固定T细胞各亚群的比例
而由福瑞德·哈金森癌症研究中心(Fred Hutchinson Cancer Research Center)主导的一项临床实验的进展是使用固定比例的CD4+/CD8+T细胞（NIH：NCT01865617，CD4：CD8=1：1）。
CAR-T免疫细胞疗法应用
五大类3
B淋巴细胞恶性肿瘤（B cell malignancies），急性骨髓性白血病（acute myeloid leukemia），非霍奇金淋巴瘤（Hodgkin lymphoma），T cell malignancies，骨髓瘤（myeloma），实体瘤（solid malignancies）。
以CD19（代表：诺华的CTL019）为靶点的适应症4
非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病、霍奇金淋巴瘤。
参考文献：
1.Therapeutic T cell engineering.Michel Sadelain, et al.
2.CD19 CAR–T cells of defined CD4+:CD8+ Composition in adult B cell ALL patients.Turtle CJ,et al.
3.Chimeric antigen receptor T cell therapy: 25 years in the making.Saar Gill,et al.
4.CAR-T疗法正从临床试验阶段走向产业化.魏巍.
CAR-T免疫细胞疗法产品资料由红荣微再编辑整理。红荣微再（上海）生物工程技术有限公司以“传递科学价值，服务科学研究”为宗旨，主营：干细胞、医疗、细胞治疗、器官再生 四大板块的产品。
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