1、HES自然沉降法:即肝素抗凝血与6%HES按5:1混合,自然沉降60min,取上层液400×g离心10min,以RPMI1640洗两遍。或者自然沉降30min,取上层液体按2:1加到淋巴细胞分离液(相对密度:1.077)的液面上层,以460g离心25分钟,采集界面层细胞,以磷酸盐缓冲液(PBS)或RPMI1640洗涤2次。
2、HES离心沉淀法:6%的羟乙基淀粉溶液与含抗凝剂的脐血按1:5或者1:6(羟乙基淀粉终浓度为:1.2%或者1.0%)比例*混匀后,经离心,(60×g,10℃,10min),取上层液400×g离心10min,以RPMI1640洗两次备用。
【Hospira羟乙基淀粉HES的注意事项】
避免过量使用引起液体负荷过重,特别是心功能不全和严重肾功能不全的病人,液体负荷过重的危险性增加,应调整剂量。为防止重度脱水,使用本品前应先给予晶体溶液。严重肝脏疾病或严重凝血功能紊乱的病人应慎用,如严重Willebrand病的患者。应补充充足的液体,定期监测肾功能和液体平衡。应密切监测血清电解质水平。有关过敏性样反应的发生,见【不良反应】项。应避免与其它药物混合。
如果在特别情况下需要与其它药物混合,要注意相容性(无絮状或沉淀)、无菌及均匀混合。瓶或袋开启后,应立即使用。超过有效期后不能使用,未用完的药品应丢弃。只有在溶液澄清及容器未损坏时使用。放在儿童不能接触到的地方。使用本品期间,如出现任何不良事件和/或不良反应,应咨询医生。同时使用其他药品,请告知医生。
【Hospira羟乙基淀粉HES的不良反应】
极个别患者在使用含羟乙基淀粉的药品时,可能发生过敏性样反应(过敏反应,类似中度流感的症状,心动过速,支气管痉挛,非心源性肺水肿)。在输液过程中,如患者发生不可耐受的反应,应立即终止给药,并给予适当的治疗处理。给予羟乙基淀粉时,患者血淀粉酶浓度将升高,可能干扰胰腺炎的诊断。
长期大剂量使用羟乙基淀粉时,患者会出现皮肤瘙痒。大剂量使用时,由于稀释效应,可能引起血液成分如凝血因子、血浆蛋白的稀释,以及红细胞压积的下降。使用羟乙基淀粉时,可能发生与剂量相关的血液凝结异常。