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转染试剂盒如何使用才能发挥Z大作用
更新时间:2017-01-06   点击次数:1738次
可生物降解的聚合物技术,是一项技术。在此技术的基础之上,合成了新一代的可生物降解多价阳离子聚合物,以此聚合物作为载体,并成功研发了转染试剂盒。转染试剂盒较市场上的其他试剂,具有更高的转染效率及更低的毒性。转染试剂盒不但适用于HEK293, COS-7, NIH-3T3, HeLa, CHO等常用细胞系,同样适用于众多难转染的细胞。
 
转染试剂盒特点:
、低毒、广谱;
操作简便;
化学性质稳定。
 
转染试剂盒使用方法
1、细胞铺板:
转染前18-24小时进行细胞的铺板,以便在转染时,贴壁细胞的密度大约在80%左右。
注:培养液中的血清和抗生素不影响转染效率。
2 、转染试剂盒复合物的制备和转染的具体方法:
转染前将所有试剂置于室温10分钟。下面,以转染35 mm培养皿为例,说明转染的具体方法(如果在别的培养器皿中进行转染,各试剂的使用量见表1):
(1)在转染前30-60分钟,将培养液更换成含血清和抗生素的新鲜培养液。
(2)将1 μg 质粒DNA稀释到50 μL无血清的高糖DMEM,用移液枪吹吸3-4次。
(3)将3 μL HighMax转染试剂稀释到50 μL无血清的高糖DMEM,用移液枪吹吸3-4次。
注:不能使用含血清的培养基进行DNA和转染试剂盒的稀释!因为转染试剂盒转染复合物的形成过程不能含有血清。
(4)将稀释好的转染试剂盒一次性全部加入到已稀释好的质粒DNA中,立即用移液枪吹吸3-4次。
注:此混合的顺序不能反向进行!
(5)室温放置10-15分钟,以形成转染试剂盒复合物。
(6)将上述100 μL 转染试剂盒转染复合物均匀滴入到含细胞的培养皿中。轻轻晃动培养皿,让转染试剂盒复合物分散均匀。
(7)转染后12-18小时,去除含转染试剂盒复合物的培养液,加入含血清和抗生素的新鲜培养液。
(8)24-48小时后检测转染的效率。

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