培养细胞中的细菌污染、酵母污染或霉菌污染都在光学显微镜下可见，但支原体污染在光学显微镜下不可见，必须通过特定的检测方法进行检测。检测支原体污染的方法有很多种，包括支原体分离培养、支原体特异酶检测、RT-PCR检测以及DNA荧光染色检测。上述检测方法中，除DNA荧光染色检测外操作步骤相对比较烦琐并且所需时间较长。本支原体检测试剂盒是通过Hoechst染色来检测支原体的。支原体检测试剂盒的荧光染色可快速、有效、高灵敏度地检测支原体污染。

　　细胞培养体系被支原体污染之后，支原体*的代谢酶类会产生支原体*的代谢产物，而真核细胞或细菌不会产生这种代谢产物，因而可以通过检测这种代谢产物而检测支原体的存在。如果样品中含有支原体特异的代谢产物，反应系统(包括样品、反应孔与反应缓冲液)会产生蓝绿色，代谢产物浓度越高，颜色越深。

　　支原体检测试剂盒储存条件

　　该试剂盒已灭菌封装。4-25℃储存，可达12个月。

　　支原体检测试剂盒的实验方法

　　1. 所有操作均在室温(22-28℃)下进行。

　　2. 打开检测板，在孔中加入40 μL Reaction Buffe A。

　　3. *个孔加入10 μL阴性对照，其他孔加入10 μL待测样品或阳性对照。

　　4. 轻轻混匀，室温孵育5分钟。

　　5. 所有孔中均加入40 μL Reaction Buffe B。

　　6. 轻轻混匀，室温孵育4分钟。

　　7. 每孔加入5μL Stop Solution，轻轻混匀。

　　8. 可在30分钟内观察样品颜色的变化或进行拍照保存：

　　a) 如果待测样品的颜色深于阴性对照，表明样品被支原体污染。

　　b) 如果待测样品的颜色与阴性对照相同，表明样品没有支原体污染。

　　如果发现有支原体污染，建议更换无污染的细胞进行培养。如果有必要去除支原体，可以使用Mycoplasma Removal Agent、cyprofloxacin或BM-Cyclin去除支原体污染。支原体检测试剂盒如用于六孔板样品检测，至少可以检测100个样品。