腺病毒纯化试剂盒的几种类型:
1.腺病毒纯化试剂盒:从1-2个T75培养皿的感染细胞培养液中纯化腺病毒
2.腺病毒大量纯化试剂盒:从6-8个T75培养皿的感染细胞培养液中纯化腺病毒
3.腺相关病毒纯化试剂盒:从1-2个T75培养皿的感染细胞培养液中纯化腺相关病毒
4.腺相关病毒大量纯化试剂盒:从6-8个T75培养皿的感染细胞培养液中纯化腺相关病毒
下面介绍一下腺病毒纯化试剂盒简单的层析过程。
没有超速离心,取而代之的是一种由VIRAPUR推出的特殊的膜,能根据腺病毒*的表面特征,特异吸附腺病毒颗粒。试剂盒提供的一次性滤器——Adeno-X纯化过滤器能适配一次性针管或者真空泵,当含有病毒的溶液流经滤器,腺病毒颗粒即被滤器中的这种膜截留。截留的病毒颗粒可以用很小体积的洗脱液洗脱下来。这个过程,从收细胞到纯化,只需要2—3小时可以搞定。
这个纯化系统由四个部件组成:储液瓶、套管、滤器和真空系统。当然,滤器是整个组合中的关键部分。在标准制备试剂盒中,滤器连接BD Luer-Lok tip syring,以针筒作为另一个真空系统。Mega试剂盒则提供连接管,以便较大的Mega滤器可以连接真空泵。
真空用于将腺病毒粗提液(即培养基上清和细胞裂解上清混合)从储液瓶抽过滤器,经过洗涤后滤器和Luer-Lok tip syring相连,用少量洗脱液洗脱病毒颗粒。节省浓缩过程。
无论是纯度还是效价,这个试剂盒的纯化结果和氯化铯梯度离心的结果相当。病毒颗粒:可感染病毒的比例在25:1—100:1之间。而且这个方法无需额外训练,简单易行。标准试剂盒(K1654-1,-2)可以得到1012的病毒颗粒(1—5x1010 ifu)Mega试剂盒的产量是标准的10倍试剂盒提供所有重要的试剂,你只要准备PBS、DNase和针筒就可以了。你会发现,纯化腺病毒从未如此简单过。
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